protein unfolding

소개글

[introduction]

실험목적:
UV-vis 분광광도계로 BSA의 흡광도를 측정하고 흡광도가 가장 높은 파장을 알아본다. 그리고 그 파장에서의 단백질의 변성을 형광 분광광도법으로 추적, 단백질 denaturation의 열역학 parameter구함. 또한 염기성인 urea에 의한 변성을 관찰하고 Gibbs Energy변화를 계산하여 folded form과 unfolded form의 안정도에 대해서도 알아본다.

[실험원리]

1.형광(fluorescence)-

형광에서는 들뜸 에너지원이 제거되고 나서 수 나노초 이내에 자발적 복사선 방출이 일어난다. 그러나 인광에서는 자발적 방출이 장시간 동안 지속될 수 있다. 이러한 차이는 흡수된 빛이 방출 에너지로 곧 변환되어 나오는 것이 형광이고, 또 흡수된 에너지가 어떤 방식으로 저장되었다가 서서히 새어 나오는 것이 인광이라는 것을 암시하는 것이다.
-형광에 관여하는 순차적 과정
첫 과정에서는 분자가 빛을 흡수하고 들뜬 전자 상태로 올라간다. 이 들뜬 분자는 주위 분자와 충돌을 하게 되고, 그리하여 에너지를 비복사 방식으로 잃게 되므로 진동 에너지 준위 사다리를 따라 내려가서 들뜬 전자 상태의 최저 진동 준위에 도달하게 된다. 주위 분자가 받아들이는 에너지는 과히 크지 않기 때문에 들뜬 분자는 바닥 전자 상태로까지 내려가지 못한다. 따라서 이 분자는 자발적 방출을 일으킬 때까지 이 들뜬 상태에 머물러 있다가 남은 들뜸 에너지를 복사선으로서 방출하게 된다.

2.형광광도법(Fluorometry)
▶ 원 리

3. UV-VIS 분광광도계
-단백질에 이용하는 이유

4.protein unfolding
[Experimetal method]
[Result]
[Discussion]
[Conclusion]

목차

1.형광(fluorescence)-
2.형광광도법(Fluorometry)
3. UV-VIS 분광광도계
4.protein unfolding

본문내용

실험목적:
UV-vis 분광광도계로 BSA의 흡광도를 측정하고 흡광도가 가장 높은 파장을 알아본다. 그리고 그 파장에서의 단백질의 변성을 형광 분광광도법으로 추적, 단백질 denaturation의 열역학 parameter구함. 또한 염기성인 urea에 의한 변성을 관찰하고 Gibbs Energy변화를 계산하여 folded form과 unfolded form의 안정도에 대해서도 알아본다.
[실험원리]
1.형광(fluorescence)-
형광에서는 들뜸 에너지원이 제거되고 나서 수 나노초 이내에 자발적 복사선 방출이 일어난다. 그러나 인광에서는 자발적 방출이 장시간 동안 지속될 수 있다. 이러한 차이는 흡수된 빛이 방출 에너지로 곧 변환되어 나오는 것이 형광이고, 또 흡수된 에너지가 어떤 방식으로 저장되었다가 서서히 새어 나오는 것이 인광이라는 것을 암시하는 것이다.
-형광에 관여하는 순차적 과정
첫 과정에서는 분자가 빛을 흡수하고 들뜬 전자 상태로 올라간다. 이 들뜬 분자는 주위 분자와 충돌을 하게 되고, 그리하여 에너지를 비복사 방식으로 잃게 되므로 진동 에너지 준위 사다리를 따라 내려가서 들뜬 전자 상태의 최저 진동 준위에 도달하게 된다. 주위 분자가 받아들이는 에너지는 과히 크지 않기 때문에 들뜬 분자는 바닥 전자 상태로까지 내려가지 못한다. 따라서 이 분자는 자발적 방출을 일으킬 때까지 이 들뜬 상태에 머물러 있다가 남은 들뜸 에너지를 복사선으로서 방출하게 된다. 이 하향 전이는 수직으로 일어나며 따라서 형광 스펙트럼에는 낮은 전자 상태의 진동 구조 특성이 나타난다.

참고 자료

없음