Southern blot, 서던 블롯

소개글

미지의 DNA로부터 원하는 DNA가 있는지 알아보는 실험이다. 원하는 DNA에 결합할 수 있는 probe를 만든다. 이때 probe DNA에 ddUTP를 포함시켜서 화학처리 시 형광을 띄도록 한다. 미지의 DNA를 restriction enzyme으로 처리하여 자른다 그런 다음 전기영동을 통해서 크기별로 구분한다. 그 후 DNA를 이동하는 방법엔 여러가지가 있지만 이번 실험에서는 모세관현상을 이용한 방법을 사용한다. Membrane에 크기별로 분리된 DNA를 이동시킨 다음 probe처리를 해서 hybridization을 시킨다. DNA에만 probe가 붙을 수 있도록 잘 washing한 뒤 형광물질을 사진찍는다. 실험 결과 1, 3, 4조에서 우리가 원하는 hygromycin 저항 DNA가 검출되었다.

목차

서론
실험 원리 및 이론
-Southern blot
-DNA의 이동 방법 : 모세관 현상을 이용한 이동(Capillary transfer)
재료 및 방법
-DNA digestion
-DNA transfer to membrane
-Probe DNA 합성
-pre hybridization, hybridization
-blot
결과 및 고찰
참고문헌
참고
-그 외의 DNA 이동 방법

본문내용

서 론
Southern blot은 DNA-DNA hybridization을 이용하여 probe DNA와 상보적인 결합을 하는 DNA를 찾거나 gene의 copy numbe를 확인, DNA library screening 실험에 사용된다.
이번 실험에서는 hygromycin probe를 이용하여 vector내의 hygromycin 저항 DNA이 존재를 blotting하여 살펴본다.

참고 자료

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