e.coli

소개글

예비보고서 cell culture

목차

1.실험원리
2.실험목적
1) 배양 (Culture)
2) 배지 (Culture Medium)
3) 제한효소 (Restriction enzyme)
4) 플라스미드 (Plasmid)
5) Competent cell preparation & Transformation
3. 시약 및 기구
4. < 도말 & 배양 >
5. <액체배지에 키우기>

본문내용

1. 실험목적
대장균(E.coli)을 배양(Culture)하면, 플라즈미드를 추출하거나 미생물의 동정(물질의 운동과 정지) 및 환경요인과 미행물의 관계 등을 알 수 있다. 본 실험에서는 E.coli가 가장 잘 자라는 배지를 만들어 E.coli를 배양해 본다.

2. 실험원리
1) 배양 (Culture)
배양이란, 미생물 또는 발생 중인 동식물의 배나 기관, 조직, 세포 등의 생물체 일부를 적당히 인공적으로 조절한 환경조건에서 생육시키는 기술을 말한다.
배양 세포는 실험 동물의 한 기관에서 얻은 세포의 성장으로부터 유래된 것으로, 세포 배양은 조직의 일부분을 무균적으로 떼에 내, 효소로부터 세포 간 연결물질을 분해하여 유리시킨 현탁액을 병이나 페트리 접시와 같은 편편한 밑부분에 도말(발라서 드러나지 않게 가림)한다. 일반적으로 세포는 우리표면에 부착할 수 있는 당 단백질성 물질을 생산한다. 이 때 글라스나 페트리 접시에 부착한 세포의 엷은 층, 즉 단층에 적당량의 배양액을 더 붓는다.
세포 배양에 사용되는 배양기 조성은 꽤 복잡하다. 많은 수의 아미노산과 비타민, 염류, 포도당, 그리고 중탄산염완충용액등이 있고, 목적하는 생물체의 생존이나 발육을 방해하는 잡균의 번식을 막는 것도 중요하며, 멸균조작 외에 항생물질을 비롯하여 각종 약품을 사용한다.

※ 배양의 형태
① scratch 기법 : 균으로 한번 긁은 후, 성장할 수 있는 길을 또 긁어 주는 형태
② spread 기법 : 균을 떨어뜨린 후 씨 뿌린 밭을 갈 듯 흩어뿌려 주는 형태

참고 자료

없음