DNA 정량

소개글

DNA 정량하는 법

목차

[Reagent]
[Method]

본문내용

[Reagent]

1. Assay solution : 10xTNE
5ml + D.W 45ml + H33258 5㎕(형광시약) = total 50ml
(1회 측정시 2ml 사용 +DNA 2㎕ / 형광시약을 넣는 양은 전체 용액의 양에 비례한다.)
2. Standard DNA : 10xTNE 1㎕ + D.W 8㎕ + CALF THYMUS 1㎕ = total 10㎕
(처음 1회만 이용, Standard값 측정)
@ TNE는 냉장보관하고, 형광시약은 빛에 산란되므로 튜브를 호일로 감싼다.

- 준비물 : Fluoremeter, 큐벳, D.W, 파이펫, 파라필름 등
@ 지문이 묻거나 기스가 나지 않도록 한손에 polyglove를 끼고 큐벳을 잡는다. G가 써있는 쪽이 앞으로 오도록 위치하고, 사용할 때 계속 같은 방향으로 오도록 한다. 헹굴 때 문지르지 않는다.
@ 큐벳을 꺼냈을 때, fluoremeter의 뚜껑은 닫아둔다.

[Method]

① 측정 20분 전에 Fluoremeter의 전원을 켠다.
② 큐벳에 Assay sol. 2ml를 넣고, 큐벳을 기계에 넣어 Enter를 누른다.
③ 메시지에 따라서 Zero를 누르면 Add Calibration Standard 라는 메시지가 뜬다.
④ 큐벳을 꺼내서 Standard DNA를 2㎕ 넣어주고, 파라필름으로 막아 흔들어 섞어준다.
(떨어뜨리지 않도록 주의한다.)

참고 자료

없음