[A+생실리포트] 식물색소분리

소개글

식물색소분리 실험 리포트입니다:D

목차

목적
방법
결과
토의
참고문헌

본문내용

목적
시금치에 들어있는 색소를 크로마토그래피로 분리하여 녹색 식물에는 어떤 색소가 들어있는지 추정해보고, 색소의 흡광도가 무엇을 의미하는지 알아본다.
재료
엽록소 추출물(시금치), 여과지(3M paper), 가위, pipette, conial tube, 전개용매(petrolium ether : acetone = 9 : 1의 혼합액), 자, tube 고정대, 접착용 테이프, 막자사발 및 막자, centrifuge, e-tube, spectrophotometer, acetone, 이쑤시개
방법
<실험1>
1. 시험관에 용매를5ml 넣고 내부에 용매기체가 포화되도록 기다린다.
2. 여과지를 tube에 적당한 크기(1.5 x 12cm)로 자르고(단, 여과지의 길이는 튜브보다 조금 길게 하고, 폭은 튜브보다 좁게 하여 종이가 튜브 벽에 닿지 않도록 한다.), 한 쪽 끝을 잘라 뾰족한 모양을 이루게 한다.
3. 엽록소 추출물은 시금치 3g에 100% aceton을 5ml 넣고 빠른 속도로 갈아서 만들고, 이를 원심 분리하여 상등액을 이용한다.
4. 원심 분리하여 얻은 용액을 conial tube에 1ml씩 넣어서 나누어 갖는다.
5. pipette tip을 4의 conial tube에 재빨리 담갔다 빼면 모세관 현상에 의해 엽록소 추출물이 tip에 고인다. 이것을 이용하여 추출물을 여과지에 묻힌다. 이때, 너무 오랫동안 tip을 담가 추출물이 지나치게 고이도록 하지 않는다. (여과지에 점이 너무 크게 찍힌다-_ㅠ)
6. 5의 과정을 10회 정도 반복하여 추출물이 충분히 여과지에 묻도록 한다.
7. 여과지를 이쑤시개에 고정시킨 후, 전개 용매가 들어 있는 tube에 넣어 약 0.5cm정도만 용매에 잠기도록 한다. 이 때 여과지가 시험관 벽에 닿지 않도록 주의한다. 오차가 생긴다.
8. 이 방법을 이용하여 몇 가지 색소가 분리되는지를 확인하고, 각 색소의 Rf 값을 구한다.
<실험2>
9. 위의 여과지에 나타난 여러 밴드 주 가장 두드러지게 나타나는 녹색밴드 부위를 다른색 밴드가 섞이지 않도록 잘라낸다.
10. 잘라낸 여과지 조각을 각 조별로 모아 e-tube에 담고 2ml의 아세톤을 부은 후 잘 흔든다.
11. Spectrophotometer를 이용하여 400-500nm와 600-700nm 파장에서 20nm 간격으로 흡광도를 측정하여 그래프를 그려 최대 흡수파장을 알아본다.

참고 자료

1. Lewis외 저, 전상학 외 역, 2007, 생명과학 길라잡이, 라이프사이언스, pp. 75-76
2. 다니엘 수능 생물 오답노트, http://blog.naver.com/genetic2002?Redirect=Log&logNo=30006737476
3. 두산세계대백과 EnCyber, http://www.encyber.com/index.html