동물발생학실험레포트 - 마우스수정란의 체외배양(IVC)
- 최초 등록일
- 2008.06.13
- 최종 저작일
- 2008.05
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소개글
실험목적
- 마우스 암컷에 PMSG, hCG를 사용하여 배란되는 eggs수를 늘려 Superovulation이 되도록 한다.
- 난관을 척출하여 과배란된 수정란을 주사기를 이용하여 flushing 하여 수정란을 나오게 한다.
- 수정란을 배아 체외 배양 배치에 옯겨 이를 적절한 배양조건에서 배양한다.
목차
실험목적
실험 방법
Discussion
본문내용
실험목적
- 마우스 암컷에 PMSG, hCG를 사용하여 배란되는 eggs수를 늘려 Superovulation이 되도록 한다.
- 난관을 척출하여 과배란된 수정란을 주사기를 이용하여 flushing 하여 수정란을 나오게 한다.
- 수정란을 배아 체외 배양 배치에 옯겨 이를 적절한 배양조건에서 배양한다.
실험 방법
① 5마리의 암컷 마우스에 1.5㎖ PMSG를 복강 주사한다. (6월 2일 17시)
② 48시간이 지나서 PMSG를 주사한 마우스들에 1.5㎖ hCG를 복강 주사한다. (6월 4일 17시)
- PMSG(pregnant mare’s serum gonadotropin) ; FSH
- hCG(human chorionic gonadotropin) ; LH
③ 수컷 마우스와 mating하여 수정 될 수 있도록 한다.
④ 3마리 마우스가 수정되었음을 확인하고 이들 마우스를 경추탈골하고 등쪽을 절개하여 난관을 적출한다.
⑤ 난관을 다치지 않게 하기위해 주사기의 끝을 갈아서 알코올램프로 달궈서 무디게 만든다.
⑥ M2 media drop을 준비해둔 petri dish에 난관을 척출하여 washing을 하고 모은다.
⑦ 현미경으로 보면서 forceps으로 난관의 끝을 잡고 주사기의 needle을 그 구멍에 넣는다. 천천히 주사기의 M2 media를 flushing 하여 난관 내의 수정란을 밀려나오게 한다.
참고 자료
Song. S. H., Park, C. S., Effectis of embryo density on development of In Vitro produced bovine embryos., Reproductive & developmental biology., 69~76(2000)
