Plant genomic DNA extraction

소개글

Plant genomic DNA extraction

목차

i. abstract
Ⅱ. Introduction
III. result

본문내용

식물의 유전체 DNA는 서던블롯분석법(Southern blot analysis), 유전체 도서관(genomic library) 제작 및 유전체 PCR(genomic PCR) 등에 필수적으로 사용된다. 지금까지 식물체에서 DNA를 분리하는 여러 방법들이 개발되었는데, 식물체에서 DNA를 분리하는 과정은 기본적으로 1) 식물체 분쇄, 2) 세포 용해(cell lysis), 3) 용해된 세포에서의 DNA 추출 등의 단계로 이루어진다.
본 실험에서는 주위에서 간단히 구할 수 있는 식물체를 이용하여 식물의 유전체 DNA를 2시간 정도의 실험시간 내에 추출하는 방법을 알아보고자 한다.
이 방법은 델라포타(Dellaporta) 등(1983)과 머레이(Murray)와 톰슨(Thomson, 1980)에 의해 개발된 식물 DNA 추출방법을 개량한 것으로서, 간단한 시약 및 용액으로 비교적 빠른 시간 내에 DNA를 분리할 수 있으며, 또한 식물체 DNA 분리에 흔히 사용되는 페놀과 클로로포름과 같은 독성물질을 사용하지 않는 단순한 방법이다.
이 방법으로 얻어진 DNA는 여러 종류의 다당류나 페놀 복합체와 같은 불순물을 완전히 제거하기는 어려우나, PCR과 기타 효소처리를 하기에 충분한 정도의 순도를 가진다. 유전체 도서관 제작과 같은 고순도의 DNA를 필요로 할 때는 CTAB(cetyltrimethylammonium bromide) 완충액이나 단백질 가수분해효소 K 완충액을 사용한 방법, 혹은 상업용으로 개발된 여러 종류의 식물 유전체 DNA 추출용 kit를 사용하는 것이 바람직하다.
보다 쉽게 식물의 DNA를 분리하기 위한 방법으로 이번 실험을 통해 식물조직의 고정여부에 따라 DNA band가 어떻게 나타나는지, RNase 처리를 했을 때와 하지 않았을 때의 band가 어떻게 나타나는지를 비교 관찰 할 수 있다.

참고 자료

없음