Cell Culture(세포 배양)

소개글

cell culture 후 작성한 보고서 입니다..

직접 현미경 사진 찍고 첨부하였습니다..

목차

Ⅰ. PRINCIPLE
1. DMEM : Dulbecco`s Modified Eagle Medium (DMEM)
2. PBS (Phosphate Buffered Saline)
1) 제조법
2) 기능
3. Trypsin-EDTA
4. Doubling Time의 계산
Ⅱ. MATERIAL & APPARATUS
Ⅲ. METHOD
1. 배지 교환
2. 계대 배양 (Subculture)
3. 관찰 (Observation)
Ⅳ. RESULT
Ⅴ. DISCUSSION

본문내용

1. DMEM : Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)
Dulbecco라는 사람이 만든 것으로 동물세포 배양용 배지이다. 세포 배양시 DMEM만 놓고 보면 아미노산, 비타민, 무기염분, 포도당, 지질, 그리고 지시약이 들어간다. 그런 까닭에 배지의 색깔만으로도 배지의 pH 변화를 대략적으로 알 수 있다(pH 7.2에서 체리 색을 띤다).그리고 세포 배양 시에는 이에 혈청을 10%정도 넣어주어야 한다. 여기에는 기타 생명이 유지되는데 필요한 호르몬이나 성장요소들을 포함하고 있으리라 생각된다. 혈청의 종류는 다양하지만 주로 송아지의 혈청이나 태반에 있는 송아지로부터 나온 혈청을 사용한다(FBS). 그리고 또 중요하게 들어가는 것이 항생제인데, 주로 페니실린/스트렙토마이신이 쓰인다.

2. PBS (Phosphate Buffered Saline)
1) 제조법
1000 ml 기준으로 NaCl 8g, KCl 0.2g 은 동일하지만, 시약에 따라 Na2HPO4 도 있지만 Na2HPO4*7H2O 이런 식으로 수화물도 있으니, 각각의 경우 넣어주는 양이 달라진다. 전자의 경우는 1.42g, 후자의 경우는 시약병 겉에 분자식과 분자량이 나와 있으니 확인하고 분자량에 0.01을 곱한 값만큼 넣어주면 된다. KH2PO4도 마찬가지로 시약병의 분자식을 확인하시고 분자량에 0.002(2 mM이므로)을 곱해준 g 값을 넣어주면 된다. DW에 이들은 다 섞었으면, HCl로 원하는 pH (보통 7.2-7.4)를 맞추고 필요에 따라 autoclave하시면 된다.

2) 기능
(1) 이온세기를 맞추어 주는 역할을 한다. 우리 몸은 일정농도의 이온농도를 가지고 있다. 따라서 이온농도가 너무 높거나 낮을 경우에는...

참고 자료

없음