[생물실험]단백질 추출및전기영동

소개글

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보시면 분명 도움되실꺼에요 ^^ ㅎ

목차

1. Introduction
2.Material & Methods
3. Data & Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

1. Introduction

Acrylamide gel은 DNA 또는 단백질의 전기영동에 이용될 수 있는데, 특히 단백질의 경우는 SDS(sodium dodecyl sulfate)를 포함한 SDS-PAGE(polyacrylamide gelelectrophoresis)를 실시한다. Polyacrylamide gel은 acrylamide 측쇄 기능기가 N,N`-methylenebisacrylamide와 같은 2개의 기능기를 가지는 화합물에 의해 교차연결 (crooss-link) 되어 형성된 polymer이다. SDS-PAGE의 효과적인 분리 범위는 polyacrylamide의 농도와 교차연결 정도에 의해 결정되며 교차연결시키는 물질이 없는 상태에서 형성된 acrylamide polymer는 쓸모없는 점액성 용액을 이루게 된다.
Bisacrylamide에 의해 교차연결되어 생긴 gel은 gel 자체의 강도와 탄성을 유지하고 SDS-polypeptide가
통과할 작은 구멍을 형성한다. 이 구멍의 크기는 bisacrylamide:acrylamide의 비율이 증가할수록 감소하여
약 1:20 정도에서 가장 작게 된다. 대부분의 SDS- polyacrylamide gel은 1:29의 몰비율로 제조하며 이 비에서 분자량이 3% 정도의 차이가 있는 polypeptide를 분리할 수 있다.
SDS의 기능을 보면 단백질 내의 소수성 부분에 결합하여 단백질 분자들간의 소수성 부분의 결합 가능성을 억제시킨다. SDS는 또한 단백질에 많은 음전하를 제공하며, 단백질 내에서의 하전된 group들의 영향을 크게 감소시킨다. 단백질의 sub-unit들은 때로는 disulphide bridges로 결합할 수 있으며, SDS는 이 결합을 깨뜨릴 수 없다. 그러나 전기영동 전에 단백질 시료를 mercaptoethanol을 사용하여 결합을
깨뜨리면 소단위들은 자유로워진다.

참고 자료

*http://dnai.co.kr/bunja/cont_bunja_22.html
*http://yasuar.hihome.com/wordhtm/protein001.htm
*http://ddibo.hihome.com/sds-page[1].html