SDS-PAGE 원리 및 실험 보고서

소개글

SDS PAGE 실험 원리 및 실헙방법, 실험결과, 실험 고찰에 관한 보고서 입니다.

목차

1. SDS-PAGE의 원리
2. 실험 준비물
3. 실험 순서
gel 만들기 순서
SDS-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)
4. 실험 결과
5. 실험 고찰

본문내용

1. SDS-PAGE의 원리
(SDS-PAGE :sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis ) 유용한 전기영동법의 한 가지입니다. 이 방법은 특히 단백질이 단위체인지 아니면 중합체인지를 결정할 때와, 소중합체를 구성하는 소단위체들의 수와 크기를 결정할 때 유용하게 사용합니다.

SDS-PAGE는 중성 pH에서 SDS과 mercaptoethanol이 전재하는 조건에서 수행됩니다. SDS는 단백질과 결합하여 단백질의 규칙적인 삼차구조를 파괴하여 불규칙하고 무작정한 코일구조를 가지게 합니다. 만일 단백질이 소중합체일 경우에는 구성 단위체들로 해리시킨 후 불규칙한 코일구조를 가지게 합니다. SDS와 단백질과의 이러한 작용은 단백질의 사슬내에 있는 이황화물 다리결합 또는 사슬들 사이의 이황화물 다리결합을 환원시키는 mercaptoethanol에 의하여 촉진됩니다. SDS가 단백질과 결합하여 단백질 복합체가 되면 단백질이 지니는 음전하는 SDS가 가진 음이온에 기인되는 것이 대부분이다. 중성 pH에서는 단백질 자체의 전하가 극소화되기 때문에 이 경우에는 단백질이 띠게되는 음전하는 단백질에 결합한 SDS에서 오는 음전하뿐이다. 종류가 다른 모든 단백질들에 대하여 SDS는 단위 무게당 일정한 양(1.4g SDS/g단백질)이 결합하므로 SDS-단백질 복합체는 질량에 대한 전하의 비가 일정하게 됩니다. 또한 SDS-단백질 복합체는 모두 불규칙한 코일구조를 가지고 있으므로 마찰계수도 동일합니다. 그러므로 SDS-단백질 복합체의 전기이동속도는 겔의 체 효과에 의해서만 좌우되며, SDS-단백질 복합체이 크기가 클수록 확산계수가 작아서 이동속도가 작아지게 됩니다.

2. 실험 준비물
1.5 M Tris-HCl pH 8.8 (adjust HCl)
1.0 M Tris-HCl pH 6.8 (adjust HCl)
10% SDS (10g/100ml DW)
TEMED

참고 자료

없음