[분자생물학실험]PCR& 전기영동&형질전환
- 최초 등록일
- 2005.04.05
- 최종 저작일
- 2004.09
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소개글
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목차
✔PCR
✔전기영동
✔TRANSFORMATION
본문내용
◉실험 제목 ✔PCR
✔전기영동
✔TRANSFORMATION
◉실험 목적
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고,PCR기술을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 수 Mini gel을 이용하여 전기 영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다.plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질 전환체를 선별하는 기술까지 분자 생물학을 공부하는데 필수적인 실험 기술을 습득한다.
◉실험원리
✔PCR (polymerase chain reaction)
중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로서, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능하므로 분자 생물학적으로 제한효소의 발견만큼 획기적인 것이라고 할 수 있다. 즉 genomic DNA와 같은 아주 큰 DNA로부터 원하는 DNA 부분만을 선택적으로 증폭시킨 후 일반적으로 사용되는 agarose gel이나 polyacrylamide gel 상에서 뚜렷하게 보이는 band로 가시화할 수가 있다.
PCR의 기본적인 원리를 이해하기 위해서 각각의 step 단위로 살펴보기로 하자. PCR machine은 단순히 온도를 정해진 program에 따라 올렸다 내렸다 하는 장치에 불과하다. 즉 PCR은 온도에 따라 denaturation, annealing, extension의 step이 한 cycle을 이루고 이러한 cycle들이 30회 정도 반복되어 지는 것이다. 그러면 어떻게 온도의 변화만으로 PCR이 일어나는지 알아보기로 하자.
참고 자료
분자생물학노트 제 3판 생명공학 연구소 이대실
분자생물학 제 2판 라이프사이언스 박상대
http://virus309.x-y.net/index.html 건국대학교 분자바이러스 실험실
http://biochemistry.yonsei.ac.kr 연세대학교 의과대학 분자생물학교실
http://www.kjcp.co.kr 광주보건대학교 임상병리과
http://genetics.cheju.ac.kr 제주대 해양생물공학과 분자유전학실험실