[생물공학실험] 분자 생물학 기초 실험

목차

DNA purification process by Wizard Plus SV Miniprep
agarose gel 만들기
제한효소를 이용한 DNA 절단

본문내용

◉실험 제목 ✔ DNA purification process by Wizard Plus SV Miniprep
✔agarose gel 만들기
✔제한효소를 이용한 DNA 절단

◉실험 목적
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고,PCR기술을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 수 Mini gel을 이용하여 전기 영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다.plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질 전환체를 선별하는 기술까지 분자 생물학을 공부하는데 필수적인 실험 기술을 습득한다.

◉실험원리
✔Preparation of Plasmid DNA
Plasmid DNA란 염색체 밖에 존재하는 DNA
(extrachromosomal small circular DNA)이다.
Plasmid DNA는 그 자체내에 replication
origin을 가지고 있어서 박테리아 내에서 염색
체 DNA 복제와 상관없이 독자적으로 복제되는
특징이 있다. 박테리아의 항생제에 대한 내성이
한 세포에서 다른 세포로 옮겨질 때 plasmid를
통해 이루어진다고 알려진 후 항생제 내성에
대한 유전자 뿐 아니라 항생제 합성이나 독물
질 합성, 질소고정 및 분해, 여러 효소들에 대한
유전자를 함께 가지고 있음이 밝혀졌다.
Plasmid는 한 세포에서 다른 세포로 옮겨갈 수
있는 성질을 지니고 있으므로 유전자를 옮기는
운반자 혹은 vector로 작용을 한다. 항생제 내
성을 지닌다는 이유로 의사들에게는 반갑지 않
은 존재로 여겨지지만 분자생물학의 연구에 있
어서는 유전자 특성 규명에 없어서는 안될 중요
한 수단으로 이용되고 있다. 즉 외부에서 연구
하고자 하는 DNA 조각을 plasmid에 삽입하여
연결시킨 후 박테리아에 넣어 주면 이 형질전환
된 세포내에서 DNA는 독자적으로 복제되므로
DNA 조각을 cloning하는 vector로 이용될 수
있는 것이다.

참고 자료

분자생물학노트 제 3판 생명공학 연구소 이대실
분자생물학 제 2판 라이프사이언스 박상대
http://virus309.x-y.net/index.html 건국대학교 분자바이러스 실험실
http://biochemistry.yonsei.ac.kr 연세대학교 의과대학 분자생물학교실
http://www.kjcp.co.kr 광주보건대학교 임상병리과
http://genetics.cheju.ac.kr 제주대 해양생물공학과 분자유전학실험실