[유전공학] PCR

목차

Ⅰ. Introduction
1. 중합효소 연쇄반응이 이용되는 실험
2. 중합효소 연쇄반응 단계
1) DNA의 변성(denaturation)
2) Primer의 결합(annealing)
3) DNA의 합성(polymerization)
3. 실험방법
4. PCR 반응 각 성분에 대해 고려할 점
1) Template DNA
2) Primer
3) dNTP (deoxynucleotide triphosphate)
4) 10x PCR 완충용액
5) Taq DNA polymerase

Ⅱ. Materials
Ⅲ. Methods
Ⅳ. Result
Ⅴ. Discussion

본문내용

중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관내에서 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법으로서, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA 합성이 가능하므로 분자 생물학적으로 제한효소의 발견만큼 획기적인 것이라고 할 수 있다. 즉 genomic DNA와 같은 아주 큰 DNA로부터 원하는 DNA 부분만을 선택적으로 증폭시킨 후 일반적으로 사용되는 agarose gel이나 polyacrylamide gel 상에서 뚜렷하게 보이는 band로 가시화할 수가 있다. 중합효소 연쇄반응을 통하여 in vitro상에서 특정 부위의 DNA를 105∼108배까지 수 시간 내에 증폭시킬 수 있으며, 이렇게 증폭된 DNA를 다음과 같이 여러 가지 실험에 이용할 수 있고, 실험 결과를 토대로 여러 의학적인 연구에 응용할 수가 있다.
1. 중합효소 연쇄반응이 이용되는 실험
1) Probe로 사용할 목적으로 cloning된 이중가닥 DNA의 증폭
2) 적은 양의 mRNA로부터 특정 cDNA의 cloning
3) DNA sequencing
4) 돌연변이 검사
5) 병인성 바이러스 및 박테리아 검출
6) 유전자의 footprinting
7) 특정 부위에 돌연변이를 일으킨 유전자의 제조(site directed mutagenesis)

참고 자료

없음