효소반응속도론결과보고서
- 최초 등록일
- 2004.12.19
- 최종 저작일
- 2004.10
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본문내용
우선 농도를 서로 다르게 한 Maltose와 증류수를 37℃에서 10분간 정치시킨 후 DNS와 반응시켜 OD를 측정하여 Maltose의 standard curve를 작성하였는데 그 결과는 다음과 같다.
최소 자승법을 이용하여 Y=aX+b에서의 a, b 값을 구할 수 있다. 여기서 구한 a값과 b값에 의해 다음의 식이 얻어졌다. a 값은 0.487714이 되고, b값은 -0.04286이 된다
Y =0.487714X-0.04286 ----①
이제 위의 식을 통하여 어떤 기질이 효소에 의해 환원되는 Maltose의 농도를 알 수 있게 되었다. 두 번째로 4조에서 실험한 starch solution과 phosphate buffer를 37℃에서 10분간 정치시킨 후( 효소가 가장 잘 반응하는 온도로 만들어 주기 위한 것임) amylase와 1.5분간 반응시킨다음 NaOH로 반응을 정지시킨다. 그러면 1.5분간 amylase가 반응하여 Maltose가 생성될 것이다. 그러나 생성된 maltose의 양을 직접 알아낼 수 없으므로 DNS시료를 취하여 OD값을 측정하였다. 4조의 실험 값은 OD값을 0.5 이내의 법위에서 측정이 가능하도록 각각의 시료를 희석하였다. (OD값이 높을 경우 투과하는 빛이 뒤의 분자를 측정하지 못하고 산란되어 실제 농도보다 낮은 OD값이 나올 수 있기 때문에 시료를 희석하여 앞의 시료가 뒤의 시료를 가리게 되는 것을 방지 하였다.)
참고 자료
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