[일반화학실험 ] 크로마토그래피-일반화학실험
- 최초 등록일
- 2004.12.02
- 최종 저작일
- 2003.06
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본문내용
1)종이 크로마토그래피를 이용한 아미노산의 분리
①크로마토그래피 종이의 위쪽 끝에서 1.5cm 되는 곳을 접은 다음 아래로부터 1cm 되는 곳에 연필로 선을 그었다. 그리고 종이의 옆선과는 0.5cm, 점과 점 사이는 1cm가 되도록 두 점을 역시 연필로 표시했다. 이와 같은 방법으로 8장을 준비했다.
②모세관으로 아미노산 혼합 용액을 빨아들인 후 ①에서 준비한 종이의 한 점에 가볍게 찍었다. 그런 다음 모세관에 남은 용액을 거름종이로 뽑아내고, 증류수로 헹구어 주었다.
③20mM Ala, Asp, His 용액도 위와 같은 방법으로 종이 위에 올린 후 완전히 말렸다.
④2-3의 과정을 3번 더 반복하여 총 8장의 종이를 만들었다.
⑤500mL 비커 하나에 첫 번째 전개 용매 10mL를 넣었다. 그 후 마찬가지로 다음 비커에는 두 번째 전개 용매 10mL를 넣는 등 같은 식으로 비커 4개를 준비하였다.
⑥앞에서 준비한 종이 한 쌍을 끈에 부착하고, 비커의 바닥에 깔린 전개액에 종이의 끝을 담구었다. 그리고 비커의 위 부분을 완전히 밀패한 후 70분 동안 전개시켰다.
⑦70분이 지난 후에 종이를 꺼낸 다음 용매가 전개된 제일 끝 부분을 표시하였다. 그 다음 이 종이를 건조기를 사용하여 완전히 건조시켰다.
⑧완전히 건조된 종이에 조교님이 닌히드린 용액을 분무기를 사용하여 뿌렸다.
⑨닌히드린 용액을 뿌린 종이들을 ⑦과 같은 방법으로 완전히 건조시킨 후, 발색 반응으로 나타난 점들의 위치를 측정하여 R값을 계산하였다.
2)역상 크로마토그래피에 의한 식용 색소의 분리
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