[유전공학] Plasmid DNA Extraction

소개글

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목차

1. 실험목적
2. 실험이론
3. 실험방법
4. 참고사항
5. 참고자료

본문내용

1. 실험목적
- 세포로부터 plasmid DNA를 분리한다.
- Alkaline lysis procedure법을 사용하여 분리한다.

2. 실험이론
★Alkaline lysis miniprep
- 기본적인 원리는 세균의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA만을 분리하는 것~이 때, 중요한 것은 세균이 원래 가직고 있는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 구분하여 분리하는 것이다. 이 둘은 모두 DNA이므로 성질이 비슷하여 구분하여 분리하기가 쉽지 않은데 Chromosomal DNA는 linear형태로 비교적 크기가 크기 때문에 성질의 차이를 이용하면 분리가 가능하다.
- alkaline lysis procedure(Bimboim, Doly, 1979)은 가장 일반적으로 쓰이는 분리방법이다. Plasmid DNA는 plasmid을 지니고 있는 bacteria에서 적은 양의 배양으로 분리될수 있다. Bacteria는 sodium dodecyle sulfate(SDS), NaOH를 함유하는 용액으로 처리하여 용균되어 진다(여기서 SDS는 bacterial proteins을 변성시키며 NaOH는 chromosomal DNA와 plasmid DNA를 변성시킨다).

참고 자료

- 유전자 클로닝
- DNA science/ 라이프사이언스