[실험방법] Western blotting(웨스턴 블롯팅)-11장 짜리

등록일 2003.09.24 한글 (hwp) | 11페이지 | 가격 2,000원

소개글

실험원리부터 실험방법까지 자세히 기재되었습니다.

목차

western blotting
원리
1. 단백질 검체의 제조
1) Protease inhibitors의 종류
2) 단백질 정량 방법
2. SDS-PAGE
1) SDS
2) Polyacrylamide gel
3) 불연속 완충액 조건
3. 전기에 의한 막으로의 단백질 이동
1) membrane의 종류
2) blotting 방법
4. 비특이결합방지
5. 특정 단백질과 특정 항원간의 항원-항체반응유도
6. 이차항체효소발색반응에 의한 항원항체복합체검출

[실험실습]
1.시약
2.기구
3.1 실험방법순서
3.2 방법
1. gel 만들기
2. Lysis
1)attached cell 일 경우
2)Suspened cell일 경우
3. 단백질 정량
4. 전기영동
5. 단백질 이동
6. 비특이 결합방지
7. 일차항체 처리
8. 이차항체 처리
9. 검출

본문내용

5. 단백질 이동 (wet transfer method)
1) 3MM paper 2장과 PVDF membrane을 gel 크기와 같게 미리 잘라 놓는다.
(손에 묻은 기름이나 분비물이 단백질 이동을 방해할 수 있으므로 반드시 장갑을 착용 한다.)
2) 용기에 차갑게 식힌 transfer buffer를 준비한다.
3) 3MM paper 2장을 2)의 transfer buffer에 담근다.
4) PVDF membrane을 methanol에 15초간 담가놓는다.
5) PVDF membrane을 증류수에 옮겨 2분간 담가놓는다.
6) PVDF membrane을 2)의 transfer buffer에 5분이상 담근다.
7) 유리판을 조심스럽게 제거한 후 gel을 적당한 크기로 잘라 transfer buffer에 적신다.
8) gel, membrane, 3MM paper를 순서대로 조립한다.
(gel/membrane/3MM paper/transfer sponge 사이에 기포가 생기지 않도록 주의한다.)
9) transfer buffer가 담긴 통에 8)에서 조립한 것을 설치한다.
10) 100V로 1시간 동안 전기영동한다.

6. 비특이 결합방지 (Blocking non-spe
*원하는 자료를 검색 해 보세요.
  • [단백질][단백질 분해효소][단백질 대사과정][단백질 흡수][단백질 결핍증]단백질 중요성, 단백질 분류, 단백질 구성요소, 단백질 기능, 단백질 분해효소, 단백질의 대사과정, 단백질의 흡수, 단백질의 결핍증 분석 8페이지
    단백질의 중요성, 단백질의 분류, 단백질의 구성요소, 단백질의 기능, 단백질의 분해효소, 단백질의 대사과정, 단백질의 흡수, 단백질의 결핍증 분석 Ⅰ. 개요 Ⅱ. 단백질의 중요성 Ⅲ. 단백질의 분류 1. 완전 단백질 2. 부분적 완전 단백질 3. 불완전 단백질 Ⅳ. 단..
  • [생명공학] 생체단백질의 정의,구조,실생활의예 5페이지
    ■ 단백질은? 신체는 단백질로 된 몇 가지의 조절물질들을 갖고 있다. 이들은 식사로 섭취한 단백질이 소화, 흡수되어 생긴 아미노산들로부터 새로이 합성되는 단백질로서 호르몬, 효소, 그리고 항체와 같은 것들이다. 갑상선 호르몬, 인슐린, 아드레날린과 같은 것들이 호르몬들..
  • 단백질 대사에 관한 모든것 26페이지
    vitamin 대사 서론 비타민 A 비타민 A 의 화학구조 비타민 A 의 급원 및 식품내에서의 활성 소화,흡수 및 대사 기능 권장량 부족증 및 과잉증 비타민 D 빛에 의한 합성 비타민 D의 급원 흡수 및 대사 기능 권장량 결핍증 및 과잉증 비타민 E 화학구조 및 급원..
  • [생물공학] 단백질공학 25페이지
    ♣ 목 차 ♣ Ⅰ 서 론 1 Ⅱ 본 론 3 1. 단백질 공학의 정의 3 2. 리보핵산(RNA)의 세계가 존재한다는 것을 증명한 새로운 단백질 3 3. 항체단백질 5 4. 인간화 항체의 개발 6 5. 대량 생산을 위한 미니항체의 개발 7 6. Bispecific scFv..
  • [생물공학] 단백질공학 16페이지
    ㅋㅋ
  • [단백질][단백질 분류][단백질 하루 섭취량][단백질 대사과정][단백질 과부족증]단백질의 개념, 단백질의 구조, 단백질의 분류와 단백질의 하루 섭취량, 단백질의 기능 및 단백질의 대사과정, 단백질의 과부족증 7페이지
    단백질의 개념, 단백질의 구조, 단백질의 분류와 단백질의 하루 섭취량, 단백질의 기능 및 단백질의 대사과정, 단백질의 과부족증 분석 Ⅰ. 개요 Ⅱ. 단백질의 개념 Ⅲ. 단백질의 구조 Ⅳ. 단백질의 분류 1. 단순 단백질(Simple protein) 1) Albumin ..
  • [생화학] 단백질의 구조와 기능 10페이지
    1. 단백질의 기본적인 화학적 구조와 단백질의 역할 단백질 분자의 기본적인 화학적 구조 [그림. 기본 아미노산의 구조] Protein : 한 개 또는 두 개 이상의 폴리펩티드 polypeptide로 이루어진 고분자는 거의 모든 세포 기능을 실행하는 물질인 단백질은 수없..
더보기
      최근 구매한 회원 학교정보 보기
      1. 최근 2주간 다운받은 회원수와 학교정보이며
         구매한 본인의 구매정보도 함께 표시됩니다.
      2. 매시 정각마다 업데이트 됩니다. (02:00 ~ 21:00)
      3. 구매자의 학교정보가 없는 경우 기타로 표시됩니다.
      4. 지식포인트 보유 시 지식포인트가 차감되며
         미보유 시 아이디당 1일 3회만 제공됩니다.
      상세하단 배너
      최근 본 자료더보기
      상세우측 배너
      추천도서
      [실험방법] Western blotting(웨스턴 블롯팅)-11장 짜리