SDS-PAGE 전기영동 실험 보고서

목차

1. SDS-PAGE에서 단백질이 분리되는 원리는?
2. SDS의 역할은?
3. Stacking gel과 Running gel이 하는 역할은?
4. 2-propyl alcohol을 사용하는 이유는?
5. Disulfide bond를 끊어주는 reducing agent를 두 가지만 쓰시오
6. 실험에서 사용한 running gel에서 acrlyamide의 최종 농도를 계산하시오.
7. 실험에서 사용한 sample 결과 분석 CTLA4lg와 albumin-eythropoietin의 band를 비교하여 각각의 sample이 어떤 것인지 분석하라

본문내용

1. SDS-PAGE에서 단백질이 분리되는 원리는?
SDS-PAGE를 통한 단백질 분리 방법은 단백질의 구조를 깨뜨려 선형으로 만든 뒤 Acrylamide gel을 이용하여 전기 영동하는 것을 말한다. SDS에 의해 처리된 단백질은 음전하를 띄게 되고 gel상에서 전기를 걸어주면 양전하 방향으로 단백질이 이동하게 되는데 이 때 전기영동은 질량뿐 아니라 분자의 구조에 따라서도 밴드의 위치가 달라지므로, 단백질을 모두 선형으로 만들어 본래의 구조에 관계없이 순수하게 질량에만 따라서 나열되게 하여 목적으로 하는 분자를 찾는 방법이다. 하지만 단백질이 선형이 되어 본래의 기능이 상실되므로 원하는 단백질만을 염색하여 나타나게 할 수는 없다. 만약 특수염색으로 원하는 단백질만을 염색하고 확인하려 할 때는 SDS를 제외한 PAGE만을 하여 단백질의 본래의 형태를 유지시켜야 한다.

참고 자료

없음