생화학적 기법 : 분자적 진단

소개글

DNA, RNA, 단백질에 대한 생화학적 기법들을 모아놓은 자료입니다.
생화학및실습 과목에서 과제 점수 10점 만점에 10점 맞았습니다.
PCR, southern blotting, western blotting, northern blotting, micro array, 그리고 ELISA 등 각 거대분자들에 대한 중요한 기법들을 한데 모아놓았습니다.
95 페이지이고, 이정도면 귀찮게 구글링 안해도 될 정도로 충분한 양으로 생각됩니다.

목차

1. DNA
1) Sequencing
2) PCR
3) Southern blotting

2. RNA
1) RT-PCR
2) Nothern blotting
3) Micro array

3. Protein
1) ELISA
2) Western blotting
3) Protein micro array

본문내용

DNA Sequencing
생화학적 방법으로 DNA 사슬에 염기 A, T, G, C가 결합된 순서를 결정하는 기술
생명체의 모든 세포, 기관을 이루는 전체 DNA 서열 정보를 얻기 위한 방법
화학적인 방법인 Maxam-Gilbert법과 효소적인 방법인 Sanger법이 있다.

1. Maxam-Gilbert법
DNA 사슬의 염기서열을 결정하기 위해 Maxam과 Gilbert가 개발한 방법
DNA 의 한쪽 사슬만을 방사성을 가진 동위원소로 표지 하여 두고 각 염기에 특이적인 화학물질을 이용하여 DNA 사슬을 절단하여 염기서열을 결정하는 방법
초기에는 G, G＋A, T＋C, C에 특이적인 4종의 절단반응이 사용되었으나 후에 개량되어 많은 DNA의 염기서열이 이 방법으로 결정됨
그 이후 Sanger가 개발한 효소법이 사용되어 특수한 목적 외에는 현재로는 거의 사용하고 있지 않음

일정한 양의 특정 DNA 절편 준비
DNA 절편을 단일가닥으로 분리
분리한 DNA의 5‘-phosphate group을 32P로 labeling
이들 시료를 4개의 시험관(C, C+T, G, A+G)으로 나누고 각 시험관에 특정 염기만을 자르는 화학약품 첨가
SDS-PAGE 후 autoradiography를 통하여 염기서열 확인

참고 자료

http://pocafiamma.tistory.com/m/post/1377
김선주, 「Microarray를 이용한 유전자 발현 연구」,<대한임상미생물학회지> 4(2), 2001년
http://alth0808.blog.me/20104428326
http://blog.naver.com/numbuh4/220161920494
http://dasan.sejong.ac.kr/~yjlee/4-4.htm
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EB%B6%84%EC%9E%90%EC%83%9D%EB%AC%BC%ED%95%99#Southern_blotting.3B_.EC.84.9C.EB.8D.98_.EB.B8.94.EB.9E.8F
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%A4%91%ED%95%A9%ED%9A%A8%EC%86%8C_%EC%97%B0%EC%87%84_%EB%B0%98%EC%9D%91
http://m.kmle.co.kr/search.php?Search=southern%20blot
https://prezi.com/zy-dhwmf0ujo/southern-blooting/
http://tip.daum.net/question/52263854
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=493765&cid=50367&categoryId=50367
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=428805&cid=42411&categoryId=42411