[분자생물학] RNA preparation

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본문내용

이번실험은 RNA preparation으로 mouse(female)의 liver, testis, pancreas, stomach의 장기를 채취하여 얻은 sample로 homogenizer tube에 넣은 후 soln D 600ul을 첨가하여 homogenization 한다. 우리조는 7조로 liver을 사용하였다. 앞에 말한실험을 한후에 그 후 2M acetate60ul, water-saturated phenol 600ul 그리고 chloroform : isoamylalchol (49:1)120ul 첨가한 후 vortexing한다. 그 후 얼음에서 15분정도 방치하는데 RNA는 민감하므로 4℃유지가 중요하다. 그래서 12000rpm으로 20분동안 원심분리시 4℃유지를 해준다 여기서 상층액을따내어 tresh tube로 옮긴 후 상층액에 0.5volume의 100%아세테이트를 첨가해준다 그후 1시간동안 -20℃에서 침전시키고 다시4℃에서 12000rpm으로 30분 원심분리를 한다.

참고 자료

http://www.mrcgene.com/tri.htm
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/