형광을 이용한 단백질의 구조분석

목차

1. 재료&시약
2. 방법
3. 결과

본문내용

1. 재료&시약
lysis buffer(50mM Tris HCl pH8.0), cy3(fluoresence chemical), PDI, PDI+EGF reduce(37‘C에서 8시간 이상 놔둬서 재배열하여 folding 시켜준다), cy5, fluorescence 기계

2. 방법
큐벳에 ①lysis buffer ②cy3 ③PDI ④PDI+EGF reduced를 차례대로 1ml 씩 넣고 start를 클릭해 흡광도를 잰 후 analysis를 눌러 그래프로 나타낸다. windows에서 Mos 250을 click하면 처음화면으로 돌아간다.

3. 결과
1. lysis buffer의 경우 peak가 안 나왔고, cy3의 경우에 330nm에서 나온 peak는 cy3도 binding 구조를 가지기 때문에 tryptophan, tyrosine, phenylalanine를 가지고 있어 peak가 나온 것이고, 530nm에서 나온 peak는 cy3의 emission peak인 것 같다.

참고 자료

http://www.ebi.ac.uk/pdbsum/2B5E
http://www.ebi.ac.uk/pdbsum/3BOA
structure.yonsei.ac.kr/docu/FRET_.ppt