[생화학 실험] 단백질(효소)의 활성 측정 및 SDS- PAGE

목차

1. 실험 날짜
2. 실험 제목 및 목적
3. 개요 – 이론 및 실험 원리
4. 실험재료 및 방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1) SDS
- SDS (Sodium Dodecyl Sulfate)는 amphipathic의 특성을 가지는 대표적인 계명활성제(detergent)로서 단백질과 가장 강력한 결합력을 보인다. 일반적으로 단백질을 구성하는 아미노산 2개에 SDS가 1개 정도가 결합하게 되어 단백질들은 고유의 전하를 다 잃어버리고 SDS에 의해 (-) 전하를 띄게 된다. SDS의 작용으로 DENATURED된 단백질은 막대기처럼 펼쳐진 상태로 acrylamide가 이루는 그물구조를 통과하게 된다. 따라서 크기가 큰 단백질일수록 그 길이가 길어 그물구조를 빠져 나오는데 시간이 오래 걸리기 때문에 이동속도가 느려지게 되고 이를 통해 단백질들이 분리가 되는 것이다.
 
2) AP (Ammonium persulfate)
자유 반응기를 생성하여 acrylamide와 bisacrylamide의 polymer를 형성시킨다. 증류수로 30% (w/v) 저장용액을 만들어 여과하고 작은 부피로 나눈 후 4도에서 보관하며, 시간이 지남에 따라 서서히 분해되므로 1~3주가 지나면 새로 만들어 사용하는 것이 좋다.
3) TEMED (N, N, N', N'-tetramethylethlenediamine)
ammonium persulfate로부터 생기는 자유반응기(free radical)의 생성을 촉매하여 acrylamide와 bisacrylamide의 polymer 형성을 촉진시킨다. TEMED는 자유염일 때에만 작용하므로 낮은 pH에서는 polymer 형성이 방해를 받는다.

참고 자료

http://blog.naver.com/kirokkk123?Redirect=Log&logNo=90191999213
http://blog.naver.com/dyner?Redirect=Log&logNo=100206660018
http://bric.postech.ac.kr/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=399947
http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=bsi1223&logNo=90152106990