E.coli streaking, E.coli inoculation

목차

가) 실험이론과 원칙 (서론)
나) 실험재료와 방법
다) 실험결과
라) 고찰과 결론

본문내용

E.coli(대장균)은 20분마다 분열하고 40,000개 유전자를 가진 생물로, 쉽게 분열하고 유전자가 간단하기 때문에 많은 연구와 실험에 쓰인다. 이번 실험에서는 E.coli streaking과 inoculation을 해본다.

가장 먼저, streaking(도말 평판법)을 한다. 돌연변이가 없다면 single colony는 유전적으로 동일한 클론을 이루기 때문에 동일한 유전형질의 대장균을 얻기 위해서 single colony를 얻을 수 있는 streaking이 필요하다. streaking은 세균 수를 줄여 배지에 분산되도록 하는 데에 가장 많이 이용하는 방법으로 독립적으로 순수 배양 colony를 얻기 위한 가장 기본적인 방법이다. 이 streaking을 통해 배지 표면에서 colony 사이가 충분히 떨어지게 된다.

본 실험에서는 E.coli를 agar plate에 streaking한다. E.coli는 Ampicillin resistant gene을 가진 것(pMFGtk)과 Ampicillin에 sensitive한 것(Rk5265)을 사용한다. Ampicillin은 penicillin의 유도체로, bacterial cell-wall synthesis(세포벽 합성)을 방해하여 성장하는 세포를 죽이는 항생제이다. Ampicillin resistant gene을 가지면, 효소 β-lactamase가 Ap의 β-lactam ring을 분해할 수 있다. plasmid에 Ap resistant gene을 가진 E.coli는 Amp 내성이 있기 때문에 Ampicillin이 있는 agar plate에서도 살 것이고, Ap resistant gene을 가지지 않은 E.coli는 Ampicillin이 있는 agar plate에서 죽을 것이다. Ampicillin이 없는 agar plate에서는 두 종류의 E.coli 모두 살 수 있을 것이다.

참고 자료

없음