[분자생물학] DNA 증폭

목차

Ⅰ. First Cycle
II. Second Cycle
III. Third Cycle
IV. Other Cycles

본문내용

2.Components of PCR
(1) Primer set
Primer set은 forward/reverse primer라고도 부르는데 이는 DNA의 방향성과 관련이 있는 용어이다. 일단 primer set은 원하는 target region의 상보적 strand의 각 5’부위의 끝에 있는 수십 base pairs 정도의 sequences대로 인위적으로 합성한 oligonucleotides라고 이해하면 된다. 중요한 point는 상보적이라는 것과 3'end에서부터 Taq polymerase가 작용해 새로운 strand를 합성해 나가기 시작한다는 것이다.
(2) dNTPs
dNTPs는 nucleic acids (DNA,RNA)를 구성하는 LEGO block 같은 것으로 이해하면 된다. 중요한 것은 hydrogen bond가 3개인 GC 결합이 2개인 AT 결합보다 안정적이라는 것과 dNTPs는 단순한 building block의 역할을 하는 것뿐만이 아니라 polymerase가 nucleic acids를 합성해 나가는데 필요한 energy를 제공하는 역할도 한다는 것이다.
(3) Taq polymerase
Taq polymerase는 일반적으로 thermostable 혹은 heat-stable polymerase를 의미하나 원래는 그 기원이 Thermus aquaticus 라는 미생물에서 유래한 polymerase를 지칭하는 용어이다. 이 enzyme은 5’-> 3’ polymerization-dependent exonuclease activity를 가지고 있고 60bps/sec이 속도로 DNA를 합성해 나간다.

참고 자료

없음