미생물학 실험 보고서 A+ <transformation efficiency 측정, 세균의 항생제 내성도 실험>

소개글

"미생물학 실험 보고서 A+ "에 대한 내용입니다.

목차

1. Introduction
2. 실험재료
3. 실험방법 및 내용
4. Result
5. Discussion

본문내용

1. Introduction
미생물 배양에 쓰이는 LB배지를 만들고, competent cell에 ampR(ampicillin저항성)유전자를 도입하고, 형질전환된 cell과 대조군 cell을 각각 배지에 배양하여 비교해보며 transformation effiency를 측정해본다. 항생제는 미생물의 성장을 막기 위해 사용된다. 항생제는 균의 세포벽, 단백질, RNA의 합성을 억제하거나 대사를 방해하여 균의 성장을 막는다. 항생제 내성 플라스미드를 가진 세균의 항생제 내성도를 알아본다.
2. 실험재료
- 항생제 agar plates 제조
LB broth (500ml) 기준 : Bacto-tryptone 5g, Yeast extract 2.5g, NaCl 5g증류수, agar, 알코올램프
- AmpR plasmid transformation
Competent cell(약 80ul cells포함), AmpR plasmid 원액 2ul(농도1ug/ul), LB+Ampicillin plates 3개 1set(counting용), 백금이, e-tube, 얼음통, 알코올램프, pipette, tip, centrifuge, incubator, 도말봉, 비이커
- 항생제 내성 플라스미드를 가진 세균의 항생제 내성도 실험
1,2번 plate, 백금이, 화염멸균세트, LB 고체 배지, LB+Amp 고체 배지, LB+Kanamycin 고체 배지(3개 1set) 2set
3. 실험방법 및 내용
1) 실험 방법
- AmpR plasmid transformation
① 멸균된 새로운 e-tube를 3개씩 준비하여 각각 labeling(1/100, 1/1000, 1/10000)하고 얼음에 미리 꽂아둔다. 그리고 따로 멸균된 e-tube를 준비하고 상온에서 plasmid 원액을 1/100, 1/1000, 1/10000으로 단계 희석한다.

참고 자료

없음