[생명과학실험] column chromatography를 위한 Tris-HCl buffer 만들기

소개글

Column chromatography를 위한 다양한 농도의 Tris-HCl buffer 제조

A+ 받은 레포트입니다. 단백질정제 전에 여러가지농도로 buffer를 제조하는 실험방법과 그 제조표를 계산해서 적어놓았습니다.

목차

1.실험날짜

2.실험주제

3.실험목표

4.introduction
- 1) buffer개념 2) 몰농도 3) pH미터기 사용법과 주의사항 4) AP정제 5) DEAE sepharose anion exchange chromatography

5.실험도구

6.실험방법

7.Results (buffer제조표)

8.discussion

9.reference

본문내용

1. 실험날짜2014년 ○월 ○일
2. 실험주제Column Chromatography를 위한 다양한 농도의 Tris-HCl Buffer의 제조
3. 실험목표1M의 Tris-HCl (pH 7.4), NaCl, MgSO₄ Stock Solution을 제조한 후 다양한 NaCl 농도의 Elution Buffer를 만든다.
4. Introductioinⅰ) Buffer Buffer(완충용액)이란 보통 약산과 그 짝염기의 혼합물을 말한다. 완충액 속의 수소이온은 음이온을 띤 염기에 의해 중화되며 용액 내의 수산이온에 의한 양성자의 환원은 산의 분해에 대응하는 균형을 이룬다. 즉, 산이나 염기가 첨개될 때 용액의 pH변화를 일정하게 유지하기 위해 사용된다. 대부분 생물학적 체액이 본질적으로 pH변화에 저항능력을 갖고 있는 것도 단백질과 같은 세포구성 성분들이 완충제 역할을 해주기 때문이다.

<중 략>

이온교환수지를 이용해 단백질정제를 하는 다음 실험을 하기 위해 이번 실험에서는 우선 buffer를 만들었다. 우리가 일단 만들어야 할 용액은 1M의 50ml의 Tris-HCl (pH 7.4)이었다. 우선적으로 1M의 용액을 만드는 이유는 일단 고농도이고 여러 buffer에서 계속 쓰이기 때문에 최대한 오차를 줄이기 위함이다.

참고 자료

줌달의 일반화학, Steven S. Zumdahl, 2010, 7th edtion, 640p,690-698p생화학, Mary K. Campbell, Shawn O.Farrell, 2006, 5th edition, 111-118p일반생물학실험서, 경희대학교 생물학과 저, 2010, 25-37phttp://www.imb-jena.de/~rake/Bioinformatics_WEB/proteins_purification.html, 2014.3.6http://en.wikipedia.org/wi
ki/ALP, 2014.3.9.http://chemistry.montana.edu/~martint/BCHM444/Purification%20of%20Alkaline%20Phosphatase.pdf, 2014,3,9http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1094240&cid=40942&categoryId=32251, 두산백과, 2014,3,9