효소반응속도론 결과보고서

목차

1. 결과및고찰
2. 문제1) Maltose의 standard curve를 작성한다.
3. 문제2) V vs. S 표 작성
4. 문제3)Lineweaver-Burk plot을 이용한 1/V vs. 1/S curve를 작성
5. 문제4)Michaelis-Menten equation의 결정

본문내용

결과및고찰
이번 실험은 amylase를 이용하여 녹말을 분해하는 반응으로부터 효소의 활성과 반응속도를 측정하여 Vmax 및 Km값을 구해봄으로써 Michaelis-Menten equation을 이해하는 것이다.
먼저 Maltose 농도에 따른 Optical Density값을 측정하였다. 그 값은 [표.1]과 같다. 이를 통해 Maltose Standard Curve를 그릴 수 있는데 그려 본 결과는 [그래프.1]과 같다. 그래프를 보면 대략 linear 형태로 나오는 것을 볼 수 있는데 추세선을 그려본 결과 y = 1.333x-0.095라는 식을 얻을 수 있었다. 여기서 y는 OD값이고 x는 maltose 농도가 된다. 이 식은 다음 실험인 Starch를 amylase와 반응시켜 형성된 maltose 농도 값을 구하는데 사용된다.
Starch를 amylase와 반응시킨 후 OD값을 측정하여 그 값을 Maltose Standard Curve에서 나온 식에 대입하면 maltose 농도를 구할 수 있다. 그 결과는 [표.2]와 같다. 이를 가지고 Substrate – Vo Curve를 구할 수 있다. Vo는 단위 시간당 maltose 생성량을 의미하는데 본 실험에서는 Starch를 amylase와 2분동안 반응 시킨 후 NaOH를 첨가 하여 반응을 종결 시켜야 한다. 하지만 우리 조는 실험 과정 중 판단을 잘못 하여 약 10분이라는 시간동안 반응을 시켰다. 그리하여 구해진 값은 [표.3]과 같으며 이를 이용하여 Substare – Vo Curve를 그려보았고 [그래프.2]와 같다. 하지만 이 그래프를 가지고 Lineweaver-Burk plot을 이용해 1/V vs. 1/S curve를 구하기에 무리가 있기 때문에 Starch 15,20 mg/mL 값을 제외 하여 나타낸 그래프가 [그래프.3]이고 이를 바탕으로 그린 1/V vs. 1/S curve는 [그래프. 4]이다. R^2값이 1이기 때문에 추세선으로 나타낸 식이 전체의 그래프를 나타낸다고 볼 수 있다.

참고 자료

없음