[생명공학실험] Plasmid DNA Isolation & Transformation of Competent E.coli 예비리포트

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리플이염^^

목차

1. 실험 목적

2. 실험 이론
A. Plasmid (그림 A)
B. Alkaline lysis method에 의한 plasmid DNA isolation (그림 b)
C. Plasmid DNA Detection Method
D. Trasformation(형질 전환)
E. Competent cell의 제법
F. Transformed Cell의 Selection Method

* 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적

1주차에는 Ampicillin에 대하여 저항성을 지닌 E. coli (XLⅠ-Blue, Amp-r)의 Plasmid DNA(PBluescript Ⅱ KS+, 3kb)를 isolation한 후, 2주차에 이를 Ampicillin에 대하여 저항성을 지니지 않은 E. coli (XLⅠ-Blue, Amp-s)에 Transformation한다

2. 실험 이론

A. Plasmid (그림 A)
원핵 및 진핵생물의 DNA를 어떤 제한효소로 절단한 다음 필요로 하는 유전자 DNA를 클로닝(cloning)하기 위해 운반체 또는 벡터(vector)를 필요로 하는데, 플라스미드(plasmid)는 파지와 함께 이 운반체로 쓰이는 것이다. plasmid는 염색체 이외의 유전자에서, 공유결합으로 이루어진 폐쇄환상(covalent-closed circle) DNA의 형태로 세포 속에 존재하며, 숙주세포 내에서 염색체와 별도로 독립적으로 복제된다. 대부분의 plasmid는 접합과정을 통하여 다른 세포로 전달될 수 있다. 많은 plasmid들은 세포 내에서 안정하지만 때로는 불안정한 경우도 있다.

참고 자료

「유전자 크로닝 입문」제 3판 - 월드 사이언스 - 강종백외 3名역
14∼19p, 71∼73p, 92∼101p
http://www.dnai.co.kr/life/cont_life_06.html → 플라스미드 벡터
http://dnai.co.kr/bunja/cont_bunja_02.html → Plasmid의 특징 및 분리
http://ynucc.yu.ac.kr/~mmblab/ → Plasmid DNA의 분리 및 정제방법