RNA (RcBr의 유전자 발현)

목차

Ⅰ. 서론 (Introduction)
Ⅱ. 실험재료 및 방법 (Materials and Methods)
Ⅲ. 결과 (Results)
Ⅳ. 논의 (Discussion)
Ⅴ. 참고문헌

본문내용

Ⅰ. 서론 (Introduction)
1. DNA [deoxyribonucleic acid]
유전물질으로서의 DNA
DNA가 유전물질이라는 것은 20세기에 들어서야 밝혀졌다. 19세기까지는 염색체의 단백질 안에 유전정보가 들어 있을 것으로 믿었다.
영국의 세균학자 그리피스가 S형 폐렴균은 생쥐에 폐렴을 일으키고 R형 폐렴균은 감염성을 잃어버린다는 것을 밝혀냈다. 열을 가해 죽인 S형 폐렴균은 생쥐에 주입하였을 경우 감염성이 없었으나, 살아 있는 R형과 열을 가해 죽인 S형 폐렴균을 섞어서 쥐에 주입하였을 경우 폐렴에 감염된다는 것을 발견하여 죽인 S형의 어떤 물질, 즉 '형질전환 물질'이 R형을 S형으로 형질전환시켜서 생쥐가 폐렴에 감염된다는 것을 밝혀냈다.
DNA가 유전정보의 매개체로 작용한다고 하는 실험은 1944년 미국의 에이버리 등에 의해 수행되었다. 에이버리 등은 이러한 그리피스의 실험을 기초로 하여 S형의 DNA가 비감염성 R형의 DNA에 전이되어 감염성 S형으로 형질전환이 된다는것을 확인하였다.

<중 략>

① Oligo-dT 프라이머, dNTP mix, 5X buffer을 -20℃ 냉장고에서 꺼내어 ice에서 녹였다.
② Oligo-dT 프라이머, dNTP mix, 5X buffer을 vortex를 이용하여 혼합한 후 microfuge로 3초간 원심분리하여 튜브에 모았다.
③ 프라이머와 RNA 혼합물을 PCR튜브에 준비하고 잘 섞었다. (pipetting).
④ 65℃에서 5분간 인큐베이션한 후 ice에 1분 이상 두어 온도를 낮추었다.
⑤ 42℃에서 60분간 인큐베이션 하였다.
⑥ 70℃에서 15분간 인큐베이션한 후 ice에 두어 온도를 낮추고 -20℃에 보관하였다.

참고 자료

http://ko.wikipedia.org/wiki/PCR
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/PCR.php
http://blog.naver.com/lmsgood01?Redirect=Log&logNo=20043971434
http://blog.naver.com/agelf?Redirect=Log&logNo=140047338002