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[수의미생물학실습] 미생물의 확인동정 방법

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최초 등록일
2013.08.24
최종 저작일
2012.09
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목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 배경이론
4. 실험과정
5. 판독결과

본문내용

3.배경이론
■ 미생물 배양의 3단계
증균배양->선택배양->확인동정
확인동정 과정은 노동력, 비용, 시간의 소모가 많아서 확인동정 전에 간단한 스크리닝 테스트(Screening test)를 하는 경우가 많다.
■ 스크리닝 테스트(Screening test) - TSI agar
- 그람음성균의 당질대사
- Lactise, Sucrise, Dextrose(Glucose) 3개의 당을 10:10:1의 비율로 함유
- Dextrose(Glucose)가 발효되면 butt(밑둥)부분만 산성이 되어 Phenol red라는 지시약에 의하여 노란색 으로 변하게 됨.
- 사면배지 전체가 노랗게 되면 Lactose, Sucrose가 분해된 것
- 발효과정 중에 Gas의 생성 여부도 확인 할 수 있음
- Ferrous sulfate가 분해하면 H2S를 생성하여 배지의 butt(밑둥)의 일부 또는 전체가 검정색으로 변함
■ 확인 동정
1) PCR method
2) 생화학적 동정방법 공식 검출법이다.
⑴ conventional methods
- Casein hydrolysis, Starch hydrolysis, Urease hydrolysis, Indole test, Catalase test, Nitratereductase test
⑵ API kit
⑶ VITEK - Automated method, 자동화된 API 방법, 식약청, 검역원, 보건환경연구원 등 대부분의 검사 기관에서 사용하고 있음. 시간과 노동력이 매우 절감되고 신뢰도가 높음.
■ PCR
중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction, PCR)은 현재 유전물질을 조작하여 실험하는 거의 모든 과정에 사용하고 있는 검사법으로, 검출을 원하는 특정 표적 유전물질을 증폭하는 방법이다. 중합효소 연 쇄 반응에 의해, 소량의 유전물질로부터 염기 순서가 동일한 유전물질을 많은 양으로 증폭할 수 있으므로, 인간의 DNA를 증폭하여 여러 종류의 유전질환을 진단하는 데 사용된다. 또한 세균이나 바이러스, 진균의 DNA에 적용하여 감염성 질환의 진단 등에 사용할 수 있다.

참고 자료

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