[RNA]RNA 분리

소개글

저는 현재 석사과정을 마치고 병원연구소에서 임상의학을 연구하고 있습니다. 제가 직접하고 있는 분야이기 때문에 상세하고 쉽게 정리했습니다. 도움이 되었으면 좋겠네요~

목차

-RNA 분리의 원칙
-Quantification of DNA and RNA

본문내용

RNA 분리의 원칙
실험을 해 보신 분들은 RNA의 명성을 익히 들어서 알고 계실 것입니다. RNA는 DNA에 비해 불안정하기도 하지만, RNA를 파괴하는 RNase라는 효소가 악질이기 때문입니다. 이 효소는 적당히 끓이는 방법으로도 제거할 수가 없으며 실험자의 손이나 여타 실험환경에도 자욱하다고 합니다. 따라서 RNA의 분리시에는 다음과 같은 원칙에 유의하면서 합니다.
1. RNase로부터 RNA를 보호한다.
주위 환경의 RNase contamination 방지하기 위해서 시약에 DEPC라는 RNase inhibitor를 처리합니다. 용기는 대개 1회용을 쓰고, 어쩔 수 없는 경우 autoclave, baking 등을 이용합니다. 또 장갑을 착용하고 RNA work 만을 위한 용기를 씁니다. (깨끗하게 하면 됩니다. DEPC가 꼭 필요한 것은 아니라고 합니다.) 또한 세포가 파괴되면서 나오는 endogenous RNase를 억제해주어야 합니다. Guanidine HCl, Guanidinium thiocyanate와 같은 물질이 그 역할을 합니다. 따라서 RNA 분리를 위해서 세포를 파괴할 때는 반드시 세포가 파괴되자마자 위와 같은 용액에 노출이 될 수 있도록 해 주는 것이 대 원칙입니다.

참고 자료

없음