단백질 분리정제 및 기능분석 - Column chromatography의 준비,Buffer만들기

소개글

실험레포트

목차

I. 실험목표

II. Introduction

III. Materials

IV. Methods

V. Result

VI. Discussion

VII. Reference

본문내용

실험주제 : 단백질 분리정제 및 기능분석 - Column chromatography의 준비 : Buffer만들기

I. 실험목표 : 1M의 Tris-HCl(pH 7.4), NaCl, MgSO4 Stock solution을 제조한 후 다양한 NaCl농도의 Elution Buffer를 만든다.

II. Introduction
1. Buffer란?
Buffer란, 산이나 알칼리가 첨가되더라도 그 pH 변화에 영향을 받지 않는 완충용액을 말한다. 완충용액은 약산과 그 약산의 염, 또는 약염기와 그 약염기의 염을 포함한다. 완충용액이 일정한 pH를 유지할 수 있는 이유는 공통이온효과 때문이다. 즉, 약한 전해질의 수용액 속에 포함되어 있는 이온과 같은 종류의 이온을 외부에서 가해 주게 되면 그 이온의 농도가 감소하는 방향으로 반응이 이동하게 되어 새로운 평형상태에 도달하게 되어 일정 pH를 유지할 수 있다.
(HA ? A- + H+일때, 외부에서 OH-가 들어오면 H+와 반응해서 H2O가 되어 pH에 영향을 주지 않고, H+가 들어오면 A-와 반응하여 HA가 되어 역시 PH에 영향을 주지 않게 된다.)

<중 략>

VI. Discussion
이번 실험에서는 pH 7.4의 Tris-HCl Stock solution을 만들었다. 이 Stock solution이란, 고농도의 표준용액을 말하며, 실험에서 사용하는 working solution은 대부분 낮은 농도의 용액이므로 이 stock solution을 희석해서 사용한다. 이렇게 Stock solution을 만드는 이유는 한 번 만들어 두면 필요할 때마다 원하는 농도로 희석해서 사용할 수 있으므로 편리하기 때문이다. stock solution을 만드는 또다른 이점으로는, 저농도에 비해 용기의 크기가 작아도 되고 어떤 용질을 녹일때, 미량을 측정함에 있어서 오차가 생길 수 있는데 이를 커버할 수 있다는 점이다. 또한, 용액에 따라서는 농도가 진할수록 미생물에 의한 오염을 줄일 수도 있다. 하지만 너무 고농도로 만들면 나중에 희석시킬 때 어려움이 있으므로 적절한 농도로 만들어야 한다.

참고 자료

Chemistry, Steven S.Zumdahl & Susan A.Zumdahl, 2010, 8th edition, p.98, p.153, p.691
네이버 지식사전, http://terms.naver.com/entry.nhn?d ocId=297886, 2012년 03월 17일