enzymekinetics

소개글

생화학 enzyme kinetics에 관한 이론과 실험 방법입니다. 온도, 기질, 저해제, pH들을 변수로 하여 이에 따른 효소의 반응 속도를 알아보는 실험입니다. UV측정을 이용합니다.

목차

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본문내용

생체 촉매인 enzyme의 활성이 여러 요인들에 의해 어떻게 영향을 받는가에 대한 실험이 행하여진다. 온도, 기질농도, pH 그리고 다양한 inhibitor 들이 α-glucosidase enzyme 반응 속도에 미치는 영향을 조사하고, 또한 α-glucosidase의 Michaelis-menten 상수()와 최대 속도()를 결정한다.
α-glucosidase enzyme 반응속도를 측정하기 위해 합성기질인 p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside을 이용한다. α-glucosidase enzyme은 D-glucose에 α-glycosidic linkage에 의해 붙어있는 phenol 혹은 alcohol을 가진 화합물들에 작용하여 α-glycosidic linkage를 분해시키며, 단지 D-glucose와 α-glycosidic bond에 대한 특이성만이 요구되므로 분해산물이 색을 나타내는 합성 기질을 사용하면 생성 분해 산물의 양을 광도계를 이용하여 측정함으로서 enzyme 반응 속도를 쉽게 구할 수 있다. 분해 산물인 p-nitrophenol은 염기 용액 상태에서 노란 색을 띄어서 407 nm에서의 흡광도는 분해산물의 양을 나타낸다. 기질은 enzyme 없이는 아주 극미한 양이 가수분해 되어지나 α-glucosidase에 의해 가수분해가 촉진되어 진다.

참고 자료

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