PCR 및 전기영동 법
- 최초 등록일
- 2012.06.26
- 최종 저작일
- 2012.03
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소개글
본 ppt는 PCR개발의 역사와 PCR 원리를 포함하고 있으며 DNA분리를 위한 전기영동법을 포함하고 있음.
또한 real-time PCR의 원리를 포함하고 있음.
목차
없음
본문내용
What is the PCR ?
Basic requirements for PCR
“Beginning with a single molecule of the genetic material DNA, the PCR can generate 100 billion similar molecules in an afternoon. The reaction is easy to execute. It requires no more than a test tube, a few simple reagents, and a source of heat”…..by Kary Mullis
Templates (DNA: genomic DNA or cDNA)
Nucleotides (dNTPs: dATP, dTTP, dGTP, dCTP)
Primers
Polymerase (DNA polymerase)
: Taq polymerase ? A overhang
: pfu polymerase ? ‘3->5’ exonuclease activity (proofreading)
Thermal Cycler
Templates
극소량의 DNA 필요 (ng)
Target의 specific sequence 불필요
고순도의 DNA가 아니여도 상관없음
Nuclease가 없는 상태여야함
Primers
Target의 specific sequence를 필요로 함
일반적 PCR의 경우 한쌍이여야 함 (forward, reverse)
최적의 primer 조건
:15~24bp
: primer간의 Tm 값이 유사하여야 함
: 두 primer사이의 interaction을 피해야함 (primer-dimer 형성)
: primer내 GC content는 40~50%가 적당함
Polymerase Chain Reaction Components
참고 자료
없음