SDS-PAGE, ELISA, Western blot analysis

*남*

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최초 등록일: 2012.05.31
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소개글

단백질을 분석하기 위한 실험의 소개와 방법에 대한 프레젠테이션.
대본 있음. 15분-20분 분량.

본문내용

SDS-PAGE는 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis의 약어로
타깃 단백질을 size와 농도에 따라 분리할 수 있는 간단한 실험 방법입니다.
우측 상단의 사진에서 보이는 샘플과 분자량의 기준이 되는 standard protein을 비교하여 미지의 단백질의 크기와 농도를 알 수 있습니다.
계면활성제인 SDS(Sodium dodecyl sulfate)는 소수성 지방산 부분과 단백질 내부의 소수성 아미노산과의 소수성 상호작용으로
SDS의 친수성 부분인 황산기의 음전하가 단백질 표면에 나타나 단백질 고유의 전하와 관계없이 음전하를 띠게 합니다.
단백질의 전기영동에 사용되는 매질은 일반적으로 아크릴아마이드(acrylamide)와 비스아크릴아마이드의 중합체인
폴리아크릴아미드 젤(polyacrylamide gel)을 가장 많이 사용합니다.
그 이유는 단백질은 핵산보다 분자량이 작기 때문에 서던블롯, 노던블롯 분석법에서 전기영동 매질로 사용된
아가로오스 젤과 같이 구멍이 큰 매질은 사용할 수 없기 때문에 아가로오스보다 구멍이 작은 아크릴아마이드를 이용합니다.
폴리아크릴아미드 젤의 농도가 증가할수록 구멍의 크기가 작아지므로 분리하고자 하는 단백질의 분자량을 가지고 폴리아크릴아미드 겔의 농도를 정합니다. 만일 분자량에 관한 정보가 전혀 없을 경우에는, 10~20% 아크릴아마이드 젤을 사용하고, 분자량이 이만부터 이십만 정도의 단백질을 1매의 gel에서 검출하는 것이 가능합니다.

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없음

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