Agarose gel electrophoresis(예비)

소개글

아가로스젤, 전기영동

목차

1. 실험 목적
2. 실험 원리
3. 실험재료 및 방법
4. 참고문헌

본문내용

Agarose gel electrophoresis

1. 실험 목적
분리한 플라스미드 DNA를 제한효소로 처리하여 알려진 Standard DNA크기와 비교하여 정확한 플라스미드 DNA의 크기를 확인한다.

2. 실험 원리
<제한효소 처리 원리>
제한효소(restriction endonuclease)는 어떤 특정 염기서열을 인식하여 절단하는 효소이다. 제한현상은 변형되어 있지 않은 DNA의 특정 부위에서 phosphodiester bond를 잘라 파괴시킨다. 유전공학에서 제한효소는 cloning과 DNA의 분석에 가장 흔하게 쓰이는 효소로써 현재 1,200가지 이상이 잘 알려져 있으며 각각의 효소는 DNA분자의 특정 인식부위만을 자른다.
제한효소가 최초로 발견된 것은 1950년대 초에 어떤 박테리아에서는 박테리오파아지 감염에 대한 면역능이 나타난다는 사실이 우연히 관찰되었다. 이 현상을 숙주조절제한(host-controlled restriction)이라고 하는데, 그 기전이 완전히 밝혀지는 데는 20년 이상이 걸렸다. 이는 박테리오파아지가 박테리아에 부착하여 파아지 DNA를 박테리아 속으로 주입하면, 박테리아내에 존재하는 제한효소가 파지 DNA의 인식 염기서열에 부착하여 저단하므로 DNA의 복제, 증식을 차단하기 때문이다. 그러나 박테리아 자체의 DNA는 제한효소의 공격으로부터 보호되는데 이는 제한효소의 인식염기서열이 메틸화되므로 제한효소가 인식 부위에 결합할 수 없기 때문이다.

참고 자료

<책>
김영희,「분자생물학 실험서」, 월드사이언스, 2008
김경진,「미생물유전학 실험」, 지코사이언스, 2009
<인터넷>
구글, 검색어(electrophoresis) : http://www.google.co.kr/url?sa=t&rct=j&q=%EC%95%84%EA%B0%80%EB%A1%9C%EC%8A%A4%EC%A0%A4%20%EC%A0%84%EA%B8%B0%EC%98%81%EB%8F%99&source=web&cd=3&ved=0CG8QFjAC&url=http%3A%2F%2Fshri.jejunu.ac.kr%2Fboard%2Flib%2Fdown.php%3Fboardid%3Dboard_pds%26no%3D1%26num%3D1&ei=YvzITs7VPIyCmQWDvIUl&usg=AFQjCNGN207LYSEK4IkvzyhsiFZSD0CraQ&cad=rjt