서울대 생물실험 응집반응

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서울대 생물실험 응집반응

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일반 생물학 실험]

응집반응


1. Purpose
특정한 미생물을 진단하는 방법에는 특정효소를 이용한 발색반응이라든가 같은 원리로 형광을 내는 방법, 긔리고 기체, 액체 크로마토그래피를 이요하는 방법을 들 수 있다. 그러나 요즈음에는 아무래도 항체를 이용한 항원-항체의 결합반응을 이용하여 손쉽게 그리고 많은 가검물을 빠른 시간내에 검사할 수 있게 되었다. 항원-항체의 반응을 측정하는 여러 가지의 방법 가운데 응집반응의 기본 원리를 익힌다.

2. Materials & Apparatus
항원, 항혈청 (항체: 생쥐, 토끼 등의 실험동물을 사용하여 미리 만듦), 96-well plate, pipette or micropipette, HBSS(Hank`s balanced salt solution).

3. Methods
① 항혈청은 56℃에서 30분간 가열한다. 혈청의 양이 적을 때에는 희석해서 사용해도 무방하며 이 경우 굳이 가열할 필요가 없다.
② 96-well plate에 50㎕씩 첨가하고 잘 섞어준다.
③ 항원을 적절히 희석하여 각 well 에 50㎕씩 첨가하고 잘 섞어준다.
④ 실혼 혹은 37℃에서 1시간동안 반응 시켜준다.
⑤ 96-well plate를 정지시킨 채 응집반응이 일어났는가를 관찰한다.
⑥ 항원용액만, 그리고 완충용액만 넣은 대조구를 두어 비교한다.

참고 자료

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