[일반생물학]restriction digestion & gel electrophoresis

소개글

restriction enzyme은 특이성에 따라 DNA의 특정한 site를 찾아서 잘라준다. 이 실험에서 쓰이는 enzyme(BamHI, EcoRI)은 DNA상에서 특정한 site를 인식하여 T와 C사이의 phosphodiester bond를 끊어준다. 그렇게 끊어주면 circular한 plasmid DNA는 잘려서 linear한 형태로 나타난다.

목차

1.실험목적
2.실험재료및방법
3.실험결과
4.고찰

본문내용

restriction enzyme은 특이성에 따라 DNA의 특정한 site를 찾아서 잘라준다. 이 실험에서 쓰이는 enzyme(BamHI, EcoRI)은 DNA상에서 특정한 site를 인식하여 T와 C사이의 phosphodiester bond를 끊어준다. 그렇게 끊어주면 circular한 plasmid DNA는 잘려서 linear한 형태로 나타난다.
agarose gel electrophoresis은 DNA 조각을 분리하고 인식하는데 사용하는 가장 일반적인 방법이다. 이 기술은 간단하고 빠르며 다른 방식으로는 잘 안되는 DNA 용해도 가능하다. 게다가 gel 안의 DNA 위치는 저밀도의 형광물질 Ethidium Bromide을 삽입시킴으로써 결정될 수 있다. gel에 ethidium bromide가 함유되어 있으므로 전기영동하는 동안 어느 시기에나 UV하에서 DNA의 이동을 관찰할 수 있다. 그리고 전기가 gel을 통과하는 동안 DNA는 양극으로 이동하는 것이다. 이때 DNA는 인산기 때문에 음전하를 띠므로 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기, 모양에 따라 다르므로 gel안에서 종류에 따라 분리하게 되며 전기영동은 DNA의 크기, 분리, 양의 확인이 가능하다.

참고 자료

없음