[미생물학]【A+】멸균방법 및 배지종류와 순수배양기술

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목차

1. Principle

2. Materials

3. Methods
1) 멸균

2) Nutrient 배지 만들기

3) 접종방법

본문내용

※ 주의 사항
배지의 양이 너무 적으면 보존 중에 말라버리기 쉽고, 양이 너무 많으면 petri dish의 뚜껑이 접촉되어 오염될 염려가 있으므로 적절하게 양을 조절한다.

3) 접종방법
- 분산 평판법(Spread plate)
① saline에 희석해 600㎚에서 흡광도가 0.1로 맞춰진 각 균을 준비한다.
② NA 배지에 접종할 균주의 이름을 petri dish 뒷면에 각각 기재한다.
③ 95% ethanol이 담겨 있는 beaker에 유리봉을 담근다.
이 때 유리봉의 구부러진 부분이 충분히 잠기도록 한다.
④ 화염 멸균된 loof로 적당량의 균 배양액을 취하여 NA 배지의 중앙에 3~5회 주입한다.
⑤ Beaker로부터 유리봉을 꺼내어 불꽃을 통과시킨다.
이 때 배지에 닿을 유리봉 부분이 아래로 향하게 한다.
⑥ 불꽃을 통과한 유리봉을 10~15초간 식힌 후 배지 표면에 댄 후 주입된 배양액이 배지 표면에
골고루 퍼지도록 가볍게 밀고 당긴다.
⑦ 도말이 끝나면 배지 뚜껑을 덮고 유리봉을 beaker에 담근다.
⑧ 1분후 평판배지를 뒤집어서 24~48시간동안 30℃에서 배양한 뒤 관찰한다.

- 도말 평판법(Streak plate)
① saline에 희석해 600㎚에서 흡광도가 0.1로 맞춰진 각 균을 준비한다.
② NA 배지에 접종할 균주의 이름을 petri dish 뒷면에 각각 기재한다.
③ 화염 멸균한 loop를 공기 중에서 10~15초간 식힌 다음 한두 차례 섞은 배양액을 떠서 NA배지의
한쪽에 2~3회 도말한다.
④ 평판배지를 시계 반대 방향으로 120° 회전시킨 후 다시 화염 멸균시킨 loop를 식혀 앞서 도말한
부분의 끝 쪽으로부터 3~4회 도말한다.
⑤ ④의 과정을 반복한다.
⑥ 도말이 끝나면 평판배지를 뒤집어서 24~48시간동안 30℃에서 배양한 뒤 관찰한다.

참고 자료

없음