HPLC를 이용한 음료 중 caffeine 정량분석 실험

소개글

HPLC를 이용한 음료 중 caffeine 정량분석 실험 실습 보고서 입니다.

목차

1. Introduction
2. Materials & Method
3. Results
4. Discussion
5. References

본문내용

1. Introduction

-기기의 원리

HPLC 란?
HPLC는 ‘고성능액체크로마토그래피’의 약자로, ‘고압액체크로마토그래피’ 라고도 불린다.
일반적으로 시료는 컬럼 앞부분에 주입되어 이동상에 의하여 컬럼안으로 들어가게 된다.
컬럼은 고정상과 이동상으로 구성되어 있고, 이 양자와 시료사이의 화학적, 물리적 상호작용으로 시료는 분리되어 컬럼 뒷부분에서 용출된다.
따라서 시료의 용출은 이동상의 유속과 컬럼 내부에서의 시료 각 성분의 상호 작용 크기에 따라 결정된다. 이동상이 기체라면 이 속도는 매우 빨라 고속분리가 비교적 용이하다. 그러나 이동상으로 액체를 사용하는 컬럼 크로마토그래피는 기체에 비하여 이동상의 점도가 매우 높기 때문에 컬럼을 통과하는 이동상의 저항이 증가하여 분리용출에 장시간이 걸린다.
액체 크로마토그래피를 가능한 신속하게 할 목적으로 개발된 것이 오늘날의 HPLC 이다.
분리시간의 단축 즉 고속를 위해서는 먼저 이동상의 유속을 될 수 있는 대로 빠르게 하는 것이 필요하다. 이때, 컬럼의 앞부분의 압력은 매우 높아져 앞부분과 뒷부분에 큰 압력차가 생긴다. 이와 같은 조건에서 컬럼 안으로 이동상을 강제로 흘려보낼 수 있는 고성능 펌프 즉, 고압에서 일정한 운반량을 유지할 수 있는 펌프의 개발 및 공업적 제조가 필요했다.
또 신속하게 시료를 분리하기 위해서는 고정상과 이동상 사이의 평형이 짧은 시간 안에
이루어질 수 있는 고분리능 충진제가 필요하게 되는데, 이와 같은 충진제의 개발이 늦었던 것이 펌프와 함께 HPLC의 등장을 지연시킨 원인의 하나였다.
최근 수 년 사이에 고성능 펌프, 각종 고분리능 충진제, 고감도 검출기가 개발되어 오늘날의 HPLC가 완성되게 된 것이다.
HPLC란 LC의 일종으로 이동상으로 액체를 사용하여 펌프로 이동상에 녹는 혼합물을
고분리 충진제가 충전되어 있는 컬럼속에 통과시켜 신속하게 분리, 용출시키고, 용출된
각 성분을 주로 광학 검출기를 써서 분리 용출 상태를 기록계로 기록하는 방법이라 말할 수 있다. 따라서 LC는 초기엔은 High Pressure(고속)이라 불렸으나,
오늘날에는 High Performance(고성능) LC라 부르고 있다.

참고 자료

기기분석의 이해 제 6판 / 박기채 외 7인 / 사이플러스 / 제26장, 제28장
http://www.doubleharmony.co.kr/bbs/view.php?id=Content_List_Coffee&no=91
http://blog.naver.com/hmbearlkh1
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