chromato-분리 과정

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chromato 분리과정

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크로마토그래피의 분리과정
용리법에 의한 것이 일반적으로 LC에서 사용되는 방법인데 이 방법을 자세히 살펴보자.
이 방법을 다시 설명하면 A와 B의 혼합물이 있을 때 용리액( eluent )을 흘려주면 A와 B는 각각이 가진 물리적, 화학적 성질에 의해 컬럼을 통과하는 속도가 달라지고 용리띠(Elution band)를 이루며 분리되어 용출한다. 다시 말해서 정지상과 이동상 사이에서 평형분포(Equilibrium Distribution)가 일어나 속도의 차가 생기는 현상을 의미한다. 이러한 현상으로 인해 A, B중에 한 물질이 먼저 컬럼을 빠져 나오게 된다. 이렇게 용출되는 A와 B를 검출할 수 있는 검출기를 연결하면 분리되는 양상에 따라 아래와 같은 그래프를 얻을 수 있고 이를 크로마토그램(Chromatogram) 또는 용리 곡선(Elution curve)이라고 한다.
VR (Retention Volume): 머무른 부피
: 위의 그림에서 A가 컬럼으로 들어가 빠져나오기까지 소요된 용리액의 부피
tR (Retention Time): 머무른 시간
: A가 컬럼으로 들어가 빠져나오기까지 소요된 시간
이러한 분리에서 보면 앞에서 설명한 것과 같이 혼합물은 분리 과정에서 두 가지의 현상을 보인다.
시차이동 (Differential Migration) 용리가 진행되면서 A와 B가 서로 다른 속도를 가지고 컬럼 내부를 진행하여 분리되는 현상
(2) 용리띠의 퍼짐 (Spreading of elution band) 이것은 평형에 관계된 문제가 아닌 분리시 단
순히 생겨나는 현상이다. 이것은 물리적이나 속도론적인 과정에서 발생하고 동일한 물질도 분리되는 과정에서 동일한 속도로 컬럼 내부를 진행하지 않고 퍼져서 컬럼 내부를 통과하는 것을 의미한다. 이러한 퍼짐 현상에는 2가지의 확산과 3가지 질량이동 현상이 있다.
☞소용돌이 확산 (Eddy Diffusion) 정지상의 모양이 불규칙하고 크기가 달라 컬럼 내에서 시료 분자를 포함하는 이동상이 빠져나가는

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