[예비]Agarose gel 전기영동

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이론 및 실험방법

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본문내용

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1.실험제목 : Agarose gel 전기영동
2.실험일자 : 2010년 4월 2일
3.실험목적 : 분리한 플라스미드 DNA를 제한효소로 처리하여 알려진 standard DNA 크기와 비교하여 정확한 플라스미드 DNA의 크기를 확인한다.
4.실험원리
① Agarose gel 전기영동 : Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 음전하를 띠므로 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기, 모양에 따라 다르므로 매질 내에서 종류에 따라 분리하게 되며 전기영동은 DNA의 크기, 분리, 양의 확인이 가능하다. 같은 크기의 DNA 분자라도 아가로오스의 농도가 커지면 아가로스 겔의 그물구조(network structure)가 촘촘해지기 때문에 이동속도가 작아진다. 따라서 아가로오스의 농도에 따라 DNA의 분리범위가 다르다.
② Agarose gel 전기영동 할 때 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들 :
1) DNA 분자의 크기가 클수록 느리게 이동한다.
2) Agarose의 농도가 높을수록 느리게 이동한다.
3) DNA 형태(구조)에 따라 이동속도가 다르다. 일반적으로 supercoiled DNA가 가장 빨리, 그 다음 linear DNA, open circular DNA의 순으로 빠르게 이동한다.


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참고 자료

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