Gel filtration

소개글

Gel filtration 실습을 바탕으로 작성했습니다.
방법, 원리, 과정, 토의.. 등의 내용이 정리 되어 있습니다
보기 좋게 깔끔하게 작성했어요.

목차

▶▶PURPOSE
▶▶ MATERIALS
▶▶ PRINCIPLE
▶▶PROCEDURE
▶▶Result:
▶▶Discussion

본문내용

▶▶PURPOSE
Gel filtration chromatography를 통해 protein을 size에 따라 분리하기 위해

▶▶ MATERIALS
stock solution, DDW, Pipette aid, Pipette, Stirrer, Stirrer bar, Vacuum, 유리병, Beads(Sepadex-G75), Sonification machine, Column, Albumin, Ovalbumin, Chymotrypsinogen A, Ribonuclease A, Fraction collector, - UV visible spectrophotometer, cuvet, collector, tube, pump

▶▶ PRINCIPLE
<Gel filtration의 원리 >
Gel filtration (GF) 은 분자를 그것의 분자의 크기에 따라서 고유한 특징으로 나누는 것이다. 분리는 porous matrix를 이용하여 작용이 되는데, 작은 분자들과 큰 분자들은 각각이 갖는 pore에 관한 흡착력(혹은 투과성)에 의해서 분류가 된다. (큰 것이 작은 것 보다 pore에 영향을 받지 않는다) matrix는 chromatography column에 packing되어 있는 상태이다. 실험을 하게 되면 분류는 buffer용액을 matrix 안에 흘려 넣음으로써 분류가 되게 한다. 단백질 분자들은 점차적으로 그들의 고유의 분자량에 의해서 나뉘어져서 elution 이 된다. elution 되어진 단백질의 특성은 UV spectrophotometer에 의해서 관찰되고 그리고 각 protein의 fraction들로써 각각의 단백질의 특성을 알 수가 있다. Gel filtration 의 실험 과정을 간략히 살펴보면
1. Beads를 부풀려서 2. column 안에 집어넣는 packing. 3. protein loading 4. UV쬐서 detection
하는 과정을 통해, Gel filtration과정을 진행한다.

<-- gel chromatography

참고 자료

없음