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카탈라아제(Catalase)활성 측정

*종*
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최초 등록일
2010.06.20
최종 저작일
2009.10
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소개글

<실험제목> Catalase 활성 측정
<목 적> 기질농도와 효소농도에 따른 Catalase의 활성을 알아본다.
<재 료> 감자즙(Catalase), 30%과산화수소(H2O2) , 15ml tube, 원형 디스크, pipette

목차

<실 험 일
<실험제목
<목 적
<재 료
<실험방법
<실험 결과 데이터
① 기질농도에 따른 catalase 활성 측정
② 효소농도에 따른 catalase 활성 측정
<실험 토의

본문내용

<목 적> 기질농도와 효소농도에 따른 Catalase의 활성을 알아본다.
<재 료> 감자즙(Catalase), 30%과산화수소(H2O2) , 15ml tube, 원형 디스크, pipette
<실험방법>
#Catalase 준비 ; 감자를 막자사발에 넣고 갈아서 즙을 낸 뒤 즙을 용기에 담고 얼음에 박아둔다. (catalase의 농도를 100units/ml라고 가정한다.)
① 기질농도에 따른 catalase 활성 측정
30% H2O2를 15%, 7.5%, 3.75%, 0%로 희석(Dilution)한 뒤 각각의 희석된 H2O2를
튜브에 5ml씩 담는다. catalase 추출물을 각각의 튜브에 50㎕씩 분주한다. 원형디스크가 용액 윗부분까지 떠오르는 시간을 측정한다.(catalase를 일정하게 고루 퍼지게 하기 위해서 2ml부분까지 pipette을 집어넣고 분주한다.)
② 효소농도에 따른 catalase 활성 측정
3.25% H2O2를 5ml씩 4개의 tube에 각각 담는다. 그 뒤 catalase 추출물을 각각 원액, 50%, 25%, 0%(물 50㎕)로 희석한다. 각각의 튜브에 원형 디스크를 넣는다. 농도가 다른 catalase 추출물을 각각의 튜브에 50㎕씩 분주하고(이때도 2ml부분에 분주한다.) 원형 디스크가 떠오르는 시간을 측정한다.
# 과산화수소에 catalase를 넣으면 기포가 발생한다




<실험 토의>
① 기질농도에 따른 catalase 활성 측정
기질(H2O2)의 농도가 높아질수록 catalase가 반응 할 수 있는 기질 분자의 개수가 그만큼 많아지는 것이므로 효소 분자와 기질분자가 더 많이 만날 확률이 높아진다. 실험에서 실패한 데이터를 제외하고 보면 기질의 농도가 증가함에 따라 활성 속도는 catalase가 맘껏 반응 할 수 있는 만큼 증가 할 것이다. 그러나 실험 에서는 catalase의 양을 일정하게 했으므로, 기질의 농도가 높아진다고 해서 활성속도가 계속해서 높아지진 않을 것이다.
② 효소농도에 따른 catalase 활성 측정
효소농도가 높아질수록 기질과 반응할 수 있는 효소분자들의 개수가 늘어나는 것이므로 기질(H2O2) 분자들과 만날 확률이 더 높아진다. 그러므로 , ②에서 효소의 농도를 높여준 실험에서도, 기질농도를 높여준 실험 ①과 같이 활성 속도가 빨라지는 것이다. 그러나 실험에서 기질의 양은 일정하게 실험했으므로, 오랜 시간 후에 반응이 모두 끝나면 결국 효소인 catalase만 남을 것이다.

참고 자료

없음

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