세포배양실험

소개글

1. 실험 목적
생물의 조직이나 기관으로 부터 분리한 세포를 적당한 배양액 속에서 생육시키는 것을 말한다. 이러한 세포배양을 통하여 세포의 성장 주기와 세포배양법을 익힌다

2. 이론
◇ 배지
배양기, 배양액이라고도 한다. 생물은 생존 ·발육에 불가결한 물을 비롯하여 영양물질로서 다량요소 미량요소 등을 요구한다. 그 중 기체상으로 얻어지는 것을 제외하고는 모두 무기 또는 유기화합물로서 배지에 공급해 주어야 한다. 필요한 화합물은 독립영양 종속영양등 영양 형식에 따라 여러 가지이다. 보통 영양원을 탄소원 질소원 무기염류 발육인자(비타민류)등으로 나누어서 생각한다. 특히 발육인자와 관련하여 생물체에서 추출한 비교적 복잡한 조성을 가진 것을 주체로 한 경우를 천연배지라고 한다.
세균배양에는 육즙 혈청 등이, 곰팡이배양에는 맥아추출물 등이 흔히 사용된다. 이에 대하여 무기염류만 또는 구조가 확실한 탄소원 질소원을 가한 조성이 명확한 경우를 합성배지라고 한다. 대량 배양에는 액체배지가 적당하고, 주의 보존이나 분리에는 한천 젤라틴 등을 가한 고형배지를 사용한다. 많은 종류의 세균을 포함하는 재료로부터 목적균을 추출하기 위한 배지를 선택배지라고 한다. 배지는 완전히 멸균한 후에 목적균을 심지 않으면 잡균이 증식될 염려가 있고, 배지를 보존하기 위해서도 반드시 멸균이 필요하다.

◇ 멸균
멸균이란 대상 물체에 존재하는 모든 생명체들을 완전히 죽이는 조작을 말한다. 실험실에서 많이 사용되는 방법들을 요약하면 다음과 같다.
① 화염멸균 (Sterilization by open fire)
미생물의 접종 및 도말할 때 사용되는 백금이와 유리도말기, 시험관이나 플라스크의 입언저리처럼 불꽃에 직접 접촉하여도 안전한 물건에 묻어 있는 미생물들을 불꽃에 의해 죽이는 방법을 말한다.
② 건열멸균 (Sterilization by dry heat)
유리기구 등과 같이 고온에 안전한 물체를 멸균할 때 사용하는 방법이다. 대상물체를 오븐에 넣고 170℃에서 90분간 넣어둔다.
③ 습열멸균 (Sterilization by moist heat)
주로 배양배지 같은 용액들을 멸균할 때 사용되며 고압증기멸균기(autoclave)를 사용하여 이루어진다. Autoclave는 대상용액이 밀폐된 상태에서 1kg/의 증기압에서(120℃) 20분 이상 처리하여 멸균하는 기계이다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험이론
3. 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 주의 사항

본문내용

1. 실험 목적
생물의 조직이나 기관으로 부터 분리한 세포를 적당한 배양액 속에서 생육시키는 것을 말한다. 이러한 세포배양을 통하여 세포의 성장 주기와 세포배양법을 익힌다

2. 이론
◇ 배지
배양기, 배양액이라고도 한다. 생물은 생존 ·발육에 불가결한 물을 비롯하여 영양물질로서 다량요소 미량요소 등을 요구한다. 그 중 기체상으로 얻어지는 것을 제외하고는 모두 무기 또는 유기화합물로서 배지에 공급해 주어야 한다. 필요한 화합물은 독립영양 종속영양등 영양 형식에 따라 여러 가지이다. 보통 영양원을 탄소원 질소원 무기염류 발육인자(비타민류)등으로 나누어서 생각한다. 특히 발육인자와 관련하여 생물체에서 추출한 비교적 복잡한 조성을 가진 것을 주체로 한 경우를 천연배지라고 한다.
세균배양에는 육즙 혈청 등이, 곰팡이배양에는 맥아추출물 등이 흔히 사용된다. 이에 대하여 무기염류만 또는 구조가 확실한 탄소원 질소원을 가한 조성이 명확한 경우를 합성배지라고 한다. 대량 배양에는 액체배지가 적당하고, 주의 보존이나 분리에는 한천 젤라틴 등을 가한 고형배지를 사용한다. 많은 종류의 세균을 포함하는 재료로부터 목적균을 추출하기 위한 배지를 선택배지라고 한다. 배지는 완전히 멸균한 후에 목적균을 심지 않으면 잡균이 증식될 염려가 있고, 배지를 보존하기 위해서도 반드시 멸균이 필요하다.

◇ 멸균
멸균이란 대상 물체에 존재하는 모든 생명체들을 완전히 죽이는 조작을 말한다. 실험실에서 많이 사용되는 방법들을 요약하면 다음과 같다.
① 화염멸균 (Sterilization by open fire)
미생물의 접종 및 도말할 때 사용되는 백금이와 유리도말기, 시험관이나 플라스크의 입언저리처럼 불꽃에 직접 접촉하여도 안전한 물건에 묻어 있는 미생물들을 불꽃에 의해 죽이는 방법을 말한다.
② 건열멸균 (Sterilization by dry heat)
유리기구 등과 같이 고온에 안전한 물체를 멸균할 때 사용하는 방법이다. 대상물체를 오븐에 넣고 170℃에서 90분간 넣어둔다.
③ 습열멸균 (Sterilization by moist heat)
주로 배양배지 같은 용액들을 멸균할 때 사용되며 고압증기멸균기(autoclave)를 사용하여 이루어진다. Autoclave는 대상용액이 밀폐된 상태에서 1kg/의 증기압에서(120℃) 20분 이상 처리하여 멸균하는 기계이다.
④ 여과멸균 (Sterilization by filtration)
열에 약해 열을 가할 때 파괴되거나 변질되는 용액들의 멸균에 많이 사용되며 구멍의 지름이 0.22㎛ 되는 여과막을 통과시켜 용액 안의 미생물을 분리 제거하는 방법이다. 주의할 점은 바이러스와 같이 크기가 매우 작은 것들은 여과막 구멍을 통과할 수 있어 이 방법에 의해 멸균된 용액은 바이러스가 있을 수 있다는 점이다.

참고 자료

없음