미생물-9. KIT를 이용한 Bacilluscereus 생화학적 실험.

소개글

미생물 실험중, KIT를 이용한 Bacilluscereus 생화학적 실험을 하고 작성한 레포트

목차

1. 실험 목적 및 원리
2. 재료, 시약, 기구
3. 실험 방법
4. 결과
5. 고찰 및 이해
6. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적 및 원리
Bacillus Diarrhoeal Enterotoxin(BDE) visual immunoassay kit는 Bacillus cereus 의 Diarrhoeal Enterotoxin를 판별하기 위한 상업적인 실험도구로 상품명은 ELISA라고 한다. 검출법의 원리는 다음과 같다. 검출하고자 하는 물질과 결합할 수 있는 특이항체(specific antibody)가 부착된 well에 샘플을 넣었을 때, 샘플에 Bacillus cereus 가 있으면 특이항체와 결합하게 되고, 결합하지 않은 물질들은 세척하였을 때 제거된다. 효소와 결합된 항체(enzyme-linked antibody)를 처리하여 반응시키면, 효소가 결합된 항체는 특이항체와 결합하고 있는 물질과 결합하게 되고, 결합하지 않은 항원과 항체는 세척하면 제거된다. 그 다음 기질(substrate)을 넣어 주면 항체에 결합되어 있는 효소에 의해 기질의 색이 녹색으로 변하여 육안으로 색의 변화를 관찰할 수 있으며, 흡광도 분석을 통해서도 색의 변화를 확인할 수 있다.
2. 재료, 시약, 기구
Kit, 샘플, 피펫
3. 실험 방법
1) 현미경관찰
2) 배양상태를 관찰
3) BDE kit
ⅰ 준비단계
① 시험에 사용할 샘플의 수만큼 Well을 준비해서 홀더에 끼운다.
② Wash solution으로 well을 채우고 상온에서 10분 동안 기다린다.
③ 균이 담긴 broth로부터 1.5㎖를 피펫으로 취하여 Epen tube에 넣고 원심분리기에 넣어 centrifuge 7500rpm으로 10분 돌린다.
ⅱ 샘플첨가
④ 각각의 well에 -/s/+로 labelling을 한다.

참고 자료

John Garbutt, 『Essentials of Food Microbiology』, Arnold, 1997
박신인, 『식품미생물학 실험서』, 효일, 2004
이갑상, 『미생물학 분자생물학사전』, 대학서림, 1997