bradford 분석법에 의한 미지 단백질 시료의 정량

소개글

단백질의 빠른 정량을 위해서 일반적으로 사용되는 방법은 흡수분광법이다. 흡수분광법은 분자의 구조와 환경에 의해 광의 파장과 능률이 정해지는 성질을 이용한다. 강도 I0의 광이 두께 d cm 에서 몰농도 c (mol/L)의 물질을 통과해 나오는 광의 강도 I는 다음의 Lambert-Beer`s의 법칙을 따른다.

여기에서 ε는 몰흡광계수이다. 실제로 Beer의 법칙은 높은 농도(보통>0.01 mol/L)의 시료에서는 시료용액에 존재하는 각 입자들이 이웃한 입자의 전하 분포에 영향을 주므로 해서 흡수화학종 입자 사이에 평균거리가 줄어든다. 이러한 상호작용은 복사선의 일정 파장을 흡수하는 입자의

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험원리
4. 재료 및 기구

본문내용

1. 실험제목
Bradford 분석법에 의한 미지 단백질 시료의 정량

2. 실험목적
Bradford 분석법을 이용하여 미지 단백질 시료의 정량분석을 통하여 미지 단백질 시료를 파악할 수 있다.

3. 실험원리
단백질의 빠른 정량을 위해서 일반적으로 사용되는 방법은 흡수분광법이다. 흡수분광법은 분자의 구조와 환경에 의해 광의 파장과 능률이 정해지는 성질을 이용한다. 강도 I0의 광이 두께 d cm 에서 몰농도 c (mol/L)의 물질을 통과해 나오는 광의 강도 I는 다음의 Lambert-Beer`s의 법칙을 따른다.

여기에서 ε는 몰흡광계수이다. 실제로 Beer의 법칙은 높은 농도(보통>0.01 mol/L)의 시료에서는 시료용액에 존재하는 각 입자들이 이웃한 입자의 전하 분포에 영향을 주므로 해서 흡수화학종 입자 사이에 평균거리가 줄어든다. 이러한 상호작용은 복사선의 일정 파장을 흡수하는 입자의 능력을 변화시켜서 홉광도와 농도사이의 직선관계를 벗어나게 한다. 따라서 Beer의 법칙이 잘 들어맞는 적절한 농도범위의 기준용액을 만들어서 미지 시료의 농도를 분석할 수 있다. 이러한 흡수분광법에 의한 단백질 정량에 사용되는 광의 파장은 자외선영역과 가시광선영역으로 나뉜다.자외선영역에서의 흡수 분광법은 단백질에 포함되어있는 tryptophan, tyrosine, phenylalanine이 갖는 흡수를 280nm에서 정량하는 방법이다.

참고 자료

없음