[생화학]단백질 정제

소개글

단백질을 정제하는 방법에 대해 간략히 설명을 한 레포트입니다.
ppt로도 자료를 만들어 놓았으니 많은 참고 바랍니다.!

목차

1. 서 론

2. 단백질 정제의 목적

3. 단백질 용해 과정
(1) Osmotic lysis
(2) Ultrasonic waves
(3) Grinding
(4) Blenders
(5) Presses
(6) Detergent

4. 단백질의 안정화
(1) pH
(2) 온 도
(3) 중금속 오염
(4) 단백질 분해 효소의 오염
(5) 완충액의 polarity와 ionic strength
(6) 산화도

5. 단백질의 분리 정제 및 농축
(1) 추출 및 가용화
(2) 분획원심법(Centrifugation) - 원심분리
(3) 염석과 투석
(4) 칼럼 크로마토그래피(Chromatography)
(5) 겔 여과 크로마토그라피(Gel Filtration Chromatography)
(6) 이온 교환 크로마토그래피(Ion-Exchange Chromatography)
(7) 친화 크로마토그래피(Affinity Chromatography)
(8) 흡착 칼럼크로마토그래피(Adsorption Chromatography)
(9) 분배 크로마토그라피(partition chromatography)
(10) 전기 영동

6. 정제된 단백질의 순도 검정

7. 정제된 단백질의 변형 및 오염물질에 대한 처리

본문내용

1. 서 론
∙ 단백질 분리 정제
∘ 전하, 크기, 용해도에 의해 분리가능
∘ Cell harvest
∘ Lysis(crude extract)
∘ Differential centrifugation∘ Chromatography
- Ion-exchange chromatography
- Size exclusion chromatography
- Affinity chromatography(특정 물질과 결합)
단백질은 특이성 있는 효소의 촉매작용과 산소나 금속이온 등의 운반 그리고 세포 대사의 조절, 병인체로 부터의 방어, 구조단백질로 생체의 특정 형태 유지 등 다양한 생물학적 기능을 한다. 단백질들은 20여종의 아미노산으로 구성되어있지만 다양한 기능만큼 다양한 구조를 가지고 있다. 단백질은 구조와 기능이 다양함으로 몇 개의 부류로 분류하기는 어렵지만, 단백질의 3차구조에 따라 구형을 이루는 구상단백질과 섬유형을 하고 있는 섬유상 단백질로 나뉠 수 있다. 구상 단백질들은 헤모글로빈이나 사이토크롬 c와 같이 비교적 물에 잘 녹는 성질을 가지고 있으나, 섬유상 단백질들은 물에 잘녹지 않으며, 결체조직이나 근육 등의 구조물을 이루고 있다. 따라서 세포나 동물들이 생명을 유지하기 위해서는 다양한 단백질들이 모여 조화를 이루어야 건강함을 유지할 수 있다. 그래서 Cell은 수천종의 protein을 함유하고 있다. Protein은 전하, 크기, 용해도 같은 성질을 이용해 분리하며 이러한 성질은 각 protein마다 다양하다. 많은 단백질은 다른 생체분자와 결합하고 있기 때문에 단백질은 그들의 결합성질에 기초하여 분리할 수 있다. 또한 단백질의 아미노산 조성이나 배열을 결정하고 성질을 규명하는 등 단백질에 대한 연구를 위해서는 먼저 어떤 세포 또는 조직에 있는 다양한 물질로부터 단백질을 분리, 정제하여 순수한 단백질을 얻는 것은 필수적인 과정이다.
결국, 생명현상을 이해하기 위하여 세포를 구성하고 있는 단백질들 각각의 구조와 기능을 이해하는 것이 필수적이라 할 수 있다. 그러나 이들은 모두 혼재된 상태로 존재하기 때문에 이들 각각의 구조와 기능을 연구하기 위해서는 우선적으로 연구하고자 하는 단백질을 정제해야만 한다.

참고 자료

stryer biochemistry 6th