아미노산이 분리와 정성분석
- 최초 등록일
- 2009.05.05
- 최종 저작일
- 2009.04
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소개글
생화학실험, 아미노산이 분리와 정성분석
-종이크로마토그래피, 종이전기이동법, 닌히드린반응에 대한 결과 보고서입니다
목차
3.목적
4.원리
5.시약 및 기자재
6.방법
7.결과
8.고찰
9.참고문헌
10.숙제
본문내용
3.목적
아미노산의 성질을 이용해 서로 다른 아미노산 크로마토그래피와 전기영동, 발색반응을 통해 분리하고 아미노산에 대한 정보와 실험 결과를 바탕으로 미지의 아미노산이 무엇인지 알아낸다.
4.원리
1)닌하이드린 반응(Ninhydrin reaction)
α-아미노산, 펩타이드 및 단백질은 pH 4~8/100℃에서 닌하이드린과 반응하여 자주색 또는 붉은 자주색의 착생물을 형성한다. 발색은 아미노산에 따라 다르며, proline과 hydroxy proline의 경우는 황색이다. 1차 아민과 NH3도 양성반응을 보이나, 이때는 반응중 CO2가 유리되지 않는다.
닌하이드린 실험은 매우 예민하기 때문에 아미노산 및 단백질의 확인에 보편적으로 쓰일 뿐 아니라 아미노산의 정량에도 사용된다.
2)종이 크로마토그래피에 의한 아미노산의 분리
종이 크로마토그래피에서 거름종이에 수소결합과 극성친화성에 의하여 흡착된 용매는 정지산의 구실을 하고, 물과 잘 섞이지 않는 유기용매는 이동상의 구실을 한다. 그리고 거름종이는 정지상의 지지체가 된다. 종이 크로마토그래피의 장점은 미량의 시료만으로 정성적으로 분석이 가능하다는 것과 편한 실험과정에 있다. 또한 시료의 종류는 아미노산을 비록하여 탄수화물, 단백질, 펩타이드, 스테롤, 스테로이드 호르몬, 지방산 등도 가능하다.
혼합물인 시료의 용액을 거름종이에 점적하고 말린 후, 물로 포화된 유기용매 속에 그 한 끝을 담가 주면 용매는 모세관 현상에 의해서 종이의 다른 끝 쪽으로 퍼져나가거나 중력에 의해서 아래쪽으로 하강하게 된다. 이때 시료의 성분도 함께 이동하지만, 물과 유기용매에 대한 용해도의 차이에 따라서 이동 속도가 달라지게 된다. 즉, 극성분자는 수소결합과
참고 자료
1)한국생화학회 (1997) 실험생화학, p12, 탐구당, 서울
2)Goldberg, A. L. and GAff, S. A. (1986) The selective degradation of abnormal proteins in bacteria, in Maximizing Gene Expression, Reznikoff, W. and gold, L., eds., pp. 287-314, Butterworths, Stoneham, Massachusetts.
3)Granner, D. and Pilkis, S. (1990) The genes of hepatic glucose metabolism. J. Biol. Chem. 265, 10173-10176