Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis : 예비보고서

소개글

생화학실험 중 하나인 Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis에 대한 예비보고서입니다.

목차

1. 제목

2. 실험목적

3. Introduction

4. Content & Theory
⑴Recombinant DNA(or molecular cloning)
⑵Plasmids as cloning vehicles
⑶Isolation of plasmid DNA
⑷Characterization of DNA by Agarose gel electrophoresis

5. 시약과 초자
⑴Growth of bacteria
⑵Isolation of plasmid DNA - Microscale alkaline lysis method
⑶Agarose gel electrophoresis

6. 실험과정
⑴Growth of bacteria
⑵Isolation of plasmid DNA - Microscale alkaline lysis method
⑶Agarose gel electrophoresis

7. Reference

본문내용

1. 제목 : Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis
2. 실험목적 : 이 실험은 학생들에게 E.coli에서 plasmid DNA를 추출해내서 이를 electrophoresis를 통해 특성을 알아내는 방법을 소개한다.
3. Introduction
①이 실험은 E.coli의 growth와 ColE1 plasmid의 amplification을 묘사해 줄 것이다.
②large-scale boiling method or microscale alkaline lysis method 중 하나를 선택하여 plasmid DNA를 추출해내서 이 DNA의 molecular size를 agarose electrophoresis를 통해 특성을 알아내는 방법을 소개한다.

4. Content & Theory
⑴Recombinant DNA(or molecular cloning)
=>이른 한 cell 또는 organism에서 다른 type의 cell의 replicating DNA로 DNA 조각을 covalent insertion하는 것으로 구성된다. 이에 따른 hybrid DNA는 수용 cell의 자손들에게서 계속 만들어질 것이며 이에 따라 DNA는 cloned 된다. 만약 삽입된 DNA가 specific protein등의 code라면 host cell 내에서 이들 protein이 만들어 질 것이다(insulin, somatostatin and other hormones).
①recombinant DNA experiment의 basic step
=>일단 carrier로 작용할 natural DNA를 선택하고 분리해낸다(vehicle or vector). 이 DNA carrier의 both strand를 restriction endonuclease로 잘라내서 준비된 foreign DNA를 vehicle속으로 삽입한다. 이 과정 후 recombinant or hybrid DNA가 만들어진다.

참고 자료

- Modern Experimental Biochemistry, 3rd ed., Rodney Boyer.
- Merck index, 12th ed., CambridgeSoft.